...的关系。方法提取大肠癌细胞株(SW480,LOVO,HT29)mtDNA,扩增D-LOOP区,产物用DNA自动测序法进行序列分析。利用DNA重组技术将其定向插入真核表达质粒pcDNA3.1(+),并用脂质体法导入NIH3T3及LST细胞。用MitoCaptureMitochondrialApoptosisDetectionKi...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华现代内科学杂志;2006年第3卷第5期...体;基因表达 摘要应用RT-PCR方法,从U937细胞总RNA中扩增得到编码人CD46分子跨膜区和膜内区cDNA片段,用PCR方法扩增得到编码成熟的CD59胞外区蛋白的cDNA片段,连接并构建了跨膜型的CD59分子cDNA。快速克隆于pGEM-TEasy载体进行序...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...蛋白的真核表达。方法 采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)扩增登革2型病毒(NGC株)包膜糖蛋白E基因全长片段,克隆入真核表达载体pcDNA3的Pcmv启动子下游,构建重组真核表达质粒pcDNA3-E,用脂质体转染法转染NIH3T3细胞,表达产物...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...疫苗。方法采用聚合酶链反应从结核杆菌H37Rv株基因中,扩增出HSP65的编码基因,从T-H8205G2质粒扩增出G2蛋白的编码基因,经相应限制性核酸内切酶消化后,插入真核表达载体pcDNA3.1/His,并将此重组质粒通过酶切、SDS-PAGE分别测定...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2006年第6卷第9期...经p185抗原和低剂量的IL-2体外培养1周后,再用CD3抗体刺激扩增,用流式细胞仪分析其细胞表型。3T3-neu和3T3细胞分别接种于裸鼠腋窝皮下验证其致瘤性。选择具有致瘤性的3T3-neu细胞与经抗CD3抗体扩增的免疫鼠脾细胞体外混合后(1...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...织中提取总RNA,以OligodT为引物将其逆转录为cDNA,再以PCR扩增出目的DNA片段。PCR所用引物是根据人胶原XVⅢ的cDNA序列[2]设计而成,上游引物:5‘-tatagaattcATGCACAGCCACCGCGACTTCC-3‘;下游引物:5‘-tatcgtcgacCTACTTGGGGCAGTCATG-3‘由上海Sang...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...992年才克隆成功的新基因,已在多种肿瘤中发现其突变与扩增,而且mdm2突变与P53突变不共存,mdm2扩增与肿瘤转移密切相关。目前研究表明,mdm2参予细胞基本生理过程。因此,mdm2癌基因的变化对阐明肿瘤发病机理以及转移机理...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;分子生物学...段富集后构建成消减文库,随机挑取192个白色克隆,经PCR扩增,155个克隆插入有200~800bp大小片段。结论抑制消减杂交技术能有效筛选肺炎链球菌多耐药株与敏感株间差异DNA片段,可进一步通过克隆鉴定等生物信息学方法寻找与...
参考资料医源资料库;在线期刊;成都医学院学报;2010年第5卷第4期...总RNA,并逆转录合成cDNA第1条链。以此链为模板,进行PCR扩增mTNF-α,反应条件为:94℃1min,64℃1min,再72℃1min,循环28次;再72℃10min。PCR产物经沉淀、BamHI/HindIII双酶切、低溶点琼脂糖凝胶电泳回收纯化,再与相应酶切后的质粒pBK-...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...过G418筛选后,在转染后21在左右,收集转化细胞灶,分别扩增。然后将转化细胞通过软琼脂生长,推测其生长能力。若获得细胞集落,将其收集后,再度扩增。达到一定细胞数后,按106-107细胞.鼠接种裸鼠,鉴定其在体内的成...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;分子生物学