问:如果诱饵蛋白对酵母细胞是有毒的,该怎么办? 答:在有些情况下,在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好。重悬克隆于1ml的SD/–Trp,接着将重悬液平铺于5个100-mm的SD/–Trp平板。在30℃下温浴,...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术【摘要】目的构建酵母双杂交用NCLs致病相关基因CLN8的诱饵质粒,并检测其自激活作用。方法PCR扩增目的基因片段,酶切后与诱饵载体pLexA连接形成重组诱饵质粒,化学转化法将重组诱饵质粒转化到酵母细胞EGY48中,β-半乳糖苷酶...
参考资料合作平台;在线期刊;中华实用医药杂志;2004年第4卷第24期;论著...B和AD形成的杂合蛋白仍然具有正常的激活转录的功能。如酵母细胞的Gal4蛋白的DB与大肠杆菌的一个酸性激活结构域B42融合得到的杂合蛋白仍然可结合到Gal4结合位点并激活转录。Fields等人的工作标志双杂交系统的正式建立。他们...
词条摘要酵母双杂交系统是研究蛋白质相互作用的一种有效方法。本文简要介绍了双杂交体系的原理、应用和自身存在的问题,并对其最新发展做了重点阐述。 关键词酵母双杂交系统,蛋白质一蛋白质间相互作用 自从Fields和...
参考资料合作平台;医学论文;基础医学论文;生物化学拼音:jiàomǔsānshuāngzájiāoxìtǒng酵母三双杂交系统三杂交系统(three-bindinghybridsystem)用于分析蛋白和RNA间的相互作用。Senguptaxi等首先报道了应用三杂技系统分析金属调节蛋白(ironregulatoryprotein-1,IRP1)与金属反应元件(ironresponseelemen...
词条...研究病毒感染机制,也有助于阻断病毒受体的入胞。 酵母双杂合体系(yeasttwo-hybridsystem)的基本原理是利用酿酒酵母(SaccharomycesCerevisiae)的一些转录因子(如:GAL4)在生理状态下,由两个可分离、相对独立的功能结构域组成:DNA结...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...数,在同等成本条件下能将效率提高10倍。在广泛使用的酵母双杂交(Y2H)方法中,携带一个“诱饵”蛋白的酵母细胞与携带一个“猎物”蛋白的酵母细胞配对。对Y2H系统进行操纵后,只有“诱饵”与“猎物”蛋白黏在一起的细...
参考资料医药经济;生物技术;技术要闻...ciatedtranscriptionfactor1,Btf)蛋白质的相互作用。方法将利用酵母双杂交系统进行胎脑cDNA文库筛选出的蓝色克隆提取酵母质粒后转化大肠杆菌Top10,利用氨苄抗生素抗性筛选转化有AD/Library质粒的转化子,扩增后小量提取质粒,醋酸...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华实用医药杂志;2006年第6卷第2期...与HBV抗原相互作用的蛋白基因,解放军第302医院学者应用酵母双杂交系统3构建HBV抗原诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其中表达,与含肝文库质粒的酵母Y187进行配合、双杂交,在营养缺陷培养基(SD/Trp-Leu-His-Ade)上及X-αgal蓝白斑双重...
参考资料行业资讯;临床快报;肝胆病...T-PCR方法从拟南芥中分离了1个CK基因家族成员CK1A,并通过酵母双杂交等实验发现CK1A基因可能参与拟南芥的蓝光信号传导途径。蛋白质磷酸化是生物体内蛋白质功能调节的重要方式。在细胞内,蛋白质的磷酸化是由多种蛋白质激酶...
参考资料医药经济;生物技术;技术要闻