...裂解液的裂解能力,裂解将不完全,从而导致RNA得率低。质粒DNA提取常见问题分析Q:未提出质粒或质粒得率较低,如何解决?A:1.大肠杆菌老化:请涂布平板培养后,重新挑选新菌落进行液体培养。2.质粒拷贝数低:由于使用低拷...
参考资料药品天地;专业药学;实验技术;色谱技术;色谱入门...裂解液的裂解能力,裂解将不完全,从而导致RNA得率低。质粒DNA提取常见问题分析Q:未提出质粒或质粒得率较低,如何解决?A:1.大肠杆菌老化:请涂布平板培养后,重新挑选新菌落进行液体培养。2.质粒拷贝数低:由于使用低拷...
参考资料药品天地;专业药学;实验技术;色谱技术;色谱分析实例质粒提取过程参照E.Z.N.APlasmidExtractionKit进行。 (1)用无菌牙签挑取平板上白色单菌落(5~10个)分别接种至3-5mlLB培养液(Amp+)中,200rpm培养14~16小时; (2)室温下,10,000g离心1分钟收菌; (3)加入溶液I250μl,涡旋重...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术细菌质粒是一类双链、闭环的DNA,大小范围从1kb至200kb以上不等。各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份,通常情况下可持续稳定地处于染色体外的游离状态,但在一定条件下也会可逆地整...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...克隆和鉴定。 1 材料与方法 1.1 细胞、菌株和质粒载体 HL-60细胞为本实验室保存细胞株;E.coliDH5α(基因型supE44▲lacU169(Φ80lacIM15)hsdR17recAlendA1gyrA96thi-1reA1)为本实验室保存菌株;克隆载体PUC18质粒购自北方同正生物工程公...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...。近年来许多科学家和临床医生都在寻找有效的消除耐药质粒的方法,试图恢复细菌对药物的敏感性,并取得了一定的进展。本文对近年药物消除细菌耐药性质粒(R质粒)的研究进行了综述。 【关键词】消除;耐药性质粒 ...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华中西医杂志;2005年第6卷第22期...耳鼻喉科慢性扁桃体炎患者手术摘除的扁桃体。 1.1.2质粒及菌株E.coli.DH5α本室保存,E.coli.BL21trxB(DE3),大肠杆菌表达质粒pET32a(+),购自美国Nova-gen公司。 1.1.3试剂总RNA(tRNA)提取试剂TripureIsolationRe-agent、质粒提取试...
参考资料医源资料库;在线期刊;局解手术学杂志;2006年第15卷第2期...究的文献,从其有效成分长春胺药理作用的研究、通过Ri质粒改良植物材料、利用液膜分离技术提高植物材料的提取率、开发长春胺的衍生物及改良药物剂型等方面进行了综合性论述。【关键词】小蔓长春花;长春胺;Ri质粒;...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华现代中西医杂志;2009年第7卷第1期...,构建成pcDNA/b。应用脂质体介导的基因转移技术将重组质粒体外转染至人脐带静脉内皮细胞(HUVEC)。结果重组质粒转染能明显促进内皮细胞的分裂增殖。进一步将重组质粒通过脂质体介导,体外转染至人肾细胞293细胞系进行表...
参考资料合作平台;在线期刊;中华中西医杂志;2004年第5卷第13期;论著...带呈现出红色荧光,易于检测。可以检测10ng的DNA。 质粒pCMV-Myc-T10NEB标准分子量片段(1kbDNALadder)EcoR1和Xho1核酸内切酶(Takara)EcoR1和Xho1酶解缓冲液(10×Hbuffer)琼脂糖TBE或TAE缓冲液(10×)溴化乙啶染色液(10mg/ml)上样液(6×):0.25%溴酚...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术