1质粒DNA的提取 质粒DNA是细菌细胞中小的共价闭合环状双链DNA。由于基因工程中使用的载体主要是质粒,因此,质粒DNA的提取和纯化是进行基因工程的重要前提。提取质粒DNA的方法很多,下面介绍几种有代表性的程序。 1)...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...希菌对抗生素的敏感性,同时用碱裂解法对耐药菌株进行质粒的抽提,将得到的质粒转化至受体菌JM109进行质粒耐药性的鉴定。结果40株大肠埃希菌对头孢菌素等9种抗生素呈现出不同程度的耐药现象。对氨苄西林和青霉素的耐药...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医学实践杂志;2008年第7卷第2期...(有含有行当抗生素的液体培养基中生长),然后从中纯化质粒,质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒载体(如pUC系列)都能复制到很高的拷贝数,惟致只要将培养物放在标准LB培养基中生长到对数晚期,就可以大量提...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术【摘要】目的探讨耐药性质粒在肺炎克雷伯杆菌中的耐药机制。方法采用琼脂稀释法测定临床分离的31株肺炎克雷伯杆菌对阿奇霉素、氨苄西林和头孢菌素类抗生素的耐药性,采用质粒DNA小量制备的碱裂解法对耐药菌株进行质粒...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医学实践杂志;2007年第6卷第8期...裂解液的裂解能力,裂解将不完全,从而导致RNA得率低。质粒DNA提取常见问题分析Q:未提出质粒或质粒得率较低,如何解决?A:1.大肠杆菌老化:请涂布平板培养后,重新挑选新菌落进行液体培养。2.质粒拷贝数低:由于使用低拷...
参考资料药品天地;专业药学;实验技术;色谱技术;色谱入门...裂解液的裂解能力,裂解将不完全,从而导致RNA得率低。质粒DNA提取常见问题分析Q:未提出质粒或质粒得率较低,如何解决?A:1.大肠杆菌老化:请涂布平板培养后,重新挑选新菌落进行液体培养。2.质粒拷贝数低:由于使用低拷...
参考资料药品天地;专业药学;实验技术;色谱技术;色谱分析实例细菌质粒是一类双链、闭环的DNA,大小范围从1kb至200kb以上不等。各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份,通常情况下可持续稳定地处于染色体外的游离状态,但在一定条件下也会可逆地整...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...植物乳杆菌(LactobacillusplantarumCICC6002)中发现了1个隐蔽质粒(pLP2111),并将其克隆到pUC18质粒上进行测序。序列分析表明pLP2111大小为2111bp;仅有1个ORF,编码1个37.0kDa的复制蛋白;有1个17bp的重复序列重复了13次。BLAST结果显示pLp2...
参考资料医源资料库;在线期刊;成都医学院学报;2009年第4卷第1期质粒提取过程参照E.Z.N.APlasmidExtractionKit进行。 (1)用无菌牙签挑取平板上白色单菌落(5~10个)分别接种至3-5mlLB培养液(Amp+)中,200rpm培养14~16小时; (2)室温下,10,000g离心1分钟收菌; (3)加入溶液I250μl,涡旋重...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...。近年来许多科学家和临床医生都在寻找有效的消除耐药质粒的方法,试图恢复细菌对药物的敏感性,并取得了一定的进展。本文对近年药物消除细菌耐药性质粒(R质粒)的研究进行了综述。 【关键词】消除;耐药性质粒 ...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华中西医杂志;2005年第6卷第22期