...掺入标记的脱氧核苷酸,制出cD-NA标记探针。 一、缺口平移法 在适当的浓度的DNaseI作用下在一双链DNA上制造一些缺口,再利用大肠杆菌DNA聚合酶I的5’—3’外切酶活性依次切除缺口下游的核酸序列,同时将四种脱氧三...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸...有以下方法: 1)TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记) 2)LM-PCRLadder(连接介导的PCR检测) 3)TelemeraseDetection(端粒酶检测) 3、生化检测: 1)典型的生化特征:DNA片段化 2)检测方法主要有:琼脂糖...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;细胞学技术...较长,而且避免了同位素的污染。最常用的探针标记法是缺口平移法(nicktranslation),其原理如图13-1。首先用适当浓度的DNA酶Ⅰ(DNAseⅠ)在探针DNA双链上造成缺口,然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ(DNapolymerasⅠ)的5’→3’的外切酶活...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;医学遗传学基础...和5′→3′外切酶活性,无3′→5′外切酶活性。可用于缺口翻译(Nicktranslation)法标记核酸,也可用于DNA序列测定,修补DNA链等。 核酸酶有DNase、RNase、核酸酶S1等,可水解相应的DNA和RNA,核酸酶S1可降解单链DNA和RNA,用量增...
参考资料药品天地;专业药学;实验技术;基本实验技术;实验技术...和5′→3′外切酶活性,无3′→5′外切酶活性。可用于缺口翻译(Nicktranslation)法标记核酸,也可用于DNA序列测定,修补DNA链等。 核酸酶有DNase、RNase、核酸酶S1等,可水解相应的DNA和RNA,核酸酶S1可降解单链DNA和RNA,用量增...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;临床生物化学...点的技术。 DNA片段原位标记法有二种: 1、原位缺口转移(insitunick-translation,ISNT)技术,它是利用DNA多聚酶I将标记的核苷酸连接到断裂DNA的3·-OH端 2、原位缺口末端标记技术(insituendlabellingtechnique,ISEL),即TUNEL法,它...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;细胞学技术...应标记法和化学修饰标记法。 酶促反应标记探针是用缺口平移法,随机引物法或末端加尾法等把修饰的核苷酸如生物素-11-dUTP掺入到探针DNA中,制成标记探针,敏感度高于化学修饰法,但操作程序复杂,产量低,成本高。50μ...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸...cocainehepatocytesapoptosis 药物由肝脏代谢,我们通过原位缺口末端标记和流式细胞仪测定,进一步研究可卡因对鼠的肝脏损害。 1材料与方法 1.1动物分组Wistar大鼠,鼠龄35天,共60只。置于室温(20±2)℃的清洁级动物室...
参考资料资料库;在线期刊;中华现代外科学杂志;2004年第1卷第1期...嗅上皮中有末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记(TUNEL)的阳性细胞(1.93±0.31)个/200μm。摘除嗅球后TUNEL阳性细胞数增加,32h达峰值(90.9±18.03)个/200μm,以后迅速下降,维持于低水平。透射电镜下见嗅球摘除术后...
参考资料行业资讯;临床快报;神经科...,断裂点暴露出DNA分子的残端,用末端转移酶(TdT)或者缺口连接酶都可以标记上可以识别的化学物质。标记DNA断裂的3‘-羧基末端,常采用由DNA聚合酶Ⅰ催化的原位缺口转移(ISN)或用TdT介导的dUTP原位缺口末端标记(TUNEL)...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华实用医药杂志;2009年第9卷第5期