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  • 重组蛋白纯化的基本策略

    ...残余痕量杂质和必须去除杂质。分离方法选择根据蛋白特殊性质采用不同分离方法蛋白性质方法电荷(等电点)离子交换(IEX)分子量凝胶过滤(GF)疏水性疏水(HIC)反相(RPC)特异性结合亲和(AC)  ...

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  • 分子生物学试验方法探讨三-如何选择凝胶

    ...凝胶过滤介质很适合在变性条件下做纯化。变性纯化蛋白质需要复性至蛋白天然构象。Superdex75、QSepharoseFF和pheny1SepharoseFF分别被发现有助包涵体蛋白复性。一般包涵体蛋白样品纯度越高复性效果越好。SOURCE30RPC反相层...

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  • 如何选择凝胶

    ...复性好蛋白洗脱下来。固相复性避免了一般复性过程中蛋白质聚体形成,所以复性得率更高,而且无需大量稀释样品,并将复性和初纯化合二为一,大大节省时间及提高回收率。*固相复性方法也被用于以HiTrapChelating金属螯...

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  • 如何选择凝胶

    ...复性好蛋白洗脱下来。固相复性避免了一般复性过程中蛋白质聚体形成,所以复性得率更高,而且无需大量稀释样品,并将复性和初纯化合二为一,大大节省时间及提高回收率。*固相复性方法也被用于以HiTrapChelating金属螯...

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  • 小鼠腹水IgM型单抗的纯化

    ...酶(ALP)标记羊抗小鼠免疫球蛋白多抗(Immunotechinc.,France);蛋白质定量用标准蛋白(中国生物制品鉴定所);电泳低分子量标准蛋白(上海东风生化试剂公司);FPLC分离纯化系统和SuperdexTM-200 prepgrade(26/600)预装柱(Pharmacia-LKB,Sweden);酶标仪(mod...

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  • 蛋白质纯化及复性

    ...浓度,使包涵体蛋白得以复性,最后再用色谱法使目标蛋白质得到纯化。其中包涵体蛋白复性和纯化是整个过程中核心。目前重组蛋白生产中普遍存在问题是:(1)复性效率低。传统复性方法稀释法和透析法。稀释...

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  • 第60届实验室会现场精彩活动之——蛋白质分离纯化技术研讨班

    ...基因工程药物为主生物工程产品越来越多进入市场;蛋白质制备和纯化作为生物技术产品研发中关键环节,从样品制备、纯化策略到过程优化,从相关产品规定、政策解读到技术经济分析,始终是生物产业密切关注...

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  • 生物大分子制成品的正确保存方法

    ...,保存样品必须写明日期,定期检查和处理。现以保存蛋白质和酶为例:⑴低温下保存:由于多数蛋白质和酶对热敏感,通常35℃~40℃以上就会失活,冷藏于冰箱一般只能保存一周左右,而且蛋白质和酶越纯越不稳定,溶液...

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  • 蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介

    ...、纯化一般目标和方法首先,自然来源或者重组表达蛋白质经过一些粗提步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定可以用于色谱分离样品。然后进行捕获色谱(capturechromatography),主要目标是浓缩和去除大...

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  • 蛋白质、多肽液相色谱纯化方法介绍

    ...化一般目标和方法  首先,自然来源或者重组表达蛋白质经过一些粗提步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定可以用于色谱分离样品。  然后进行捕获色谱(capturechromatography),主要目标是浓缩和去...

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