1质粒DNA的提取 质粒DNA是细菌细胞中小的共价闭合环状双链DNA。由于基因工程中使用的载体主要是质粒，因此，质粒DNA的提取和纯化是进行基因工程的重要前提。提取质粒DNA的方法很多，下面介绍几种有代表性的程序。 1)...
参考资料医药经济；生物技术；实验技术；生化与分子技术...耐药性分别达到了87.5%和97.5%。从两株耐药大肠埃希菌中提取出质粒，对其中一株进行转化鉴定，确定为耐药质粒，大小约为3.0kb。结论临床分离大肠埃希菌对多种抗生素表现出较高的耐药性，而耐药性质粒的存在是细菌产生耐药...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华医学实践杂志；2008年第7卷第2期...２２－类的质粒，从经氯霉素处理和未经处理的培养物中提取质粒的产量迥然不同，前者大为增高。多年来，加入足以完全抑制蛋白质合成的氯霉素μg/ml)已成为标准的操作、用该方法提取的质粒DNA量，对于分子克隆中几乎所有...
参考资料医药经济；生物技术；实验技术；生化与分子技术...性，采用质粒DNA小量制备的碱裂解法对耐药菌株进行质粒提取，通过转化试验对质粒的耐药性进行鉴定。结果31株肺炎克雷伯杆菌对阿奇霉素、氨苄西林和头孢菌素类抗生素有不同程度的耐药现象。其中从两株耐药性肺炎克雷伯...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华医学实践杂志；2007年第6卷第8期总RNA提取常见问题分析Q：RNA降解A：1.新鲜细胞：如果试剂没有问题，且外源性污染也可以排除，那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞，一定要使裂解液能覆盖住细胞。2.新鲜组织：某...
参考资料药品天地；专业药学；实验技术；色谱技术；色谱入门总RNA提取常见问题分析Q：RNA降解A：1.新鲜细胞：如果试剂没有问题，且外源性污染也可以排除，那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞，一定要使裂解液能覆盖住细胞。2.新鲜组织：某...
参考资料药品天地；专业药学；实验技术；色谱技术；色谱分析实例...量纯化的质粒DNA分子。目前已有许多方法可用于质粒DNA的提取，本实验采用碱裂解法提取质粒DNA。 碱裂解法是一种应用最为广泛的制备质粒DNA的方法，其基本原理为：当菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，...
参考资料医药经济；生物技术；实验技术；生化与分子技术...验室保存。表1在植物乳酸杆菌中发现的质粒列表1.2质粒提取离心收集植物乳杆菌CICC6002的菌体，用华舜质粒提取试剂盒（华舜，上海）提取质粒。不同于说明书的步骤是：用GTEL溶液（葡萄糖50mmol/L，TrisCl25mmol/L，EDTA10mmol/L，溶...
参考资料医源资料库；在线期刊；成都医学院学报；2009年第4卷第1期质粒提取过程参照E.Z.N.APlasmidExtractionKit进行。 （1）用无菌牙签挑取平板上白色单菌落(5~10个)分别接种至3-5mlLB培养液(Amp+)中,200rpm培养14~16小时； （2）室温下，10,000g离心1分钟收菌； （3）加入溶液I250μl，涡旋重...
参考资料医药经济；生物技术；实验技术；生化与分子技术...除R质粒的最佳时间为48h。王云［20］等用马齿苋、金银花提取液对绿脓杆菌PA11株R质粒体内消除研究，结果显示，两种药作用24h均未获得消除子，作用48h和72hR质粒平均消除率马齿苋为2.15%、金银花为12.25%，消除子均表现为多重耐...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华中西医杂志；2005年第6卷第22期