1.标记DNA探针 每次标准的反应可标记10ng至3μg线性的DNA,也可标记更大量的DNA,但所有的成分和体积要相应增加。 (1)DNA探针热变性,煮沸10min,迅速冷却于冰/乙醇中5min以上,待用。 (2)取Eppendorf管(1.5ml)置于冰...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;实验室试剂仪器...联合法 非同位素标记物很多例如:生物素(biotin),地高辛(Digoxigenin),汞(mercury),溴(bromine)和碱性磷酸酶等,其中目前应用最多的是生物素和地高辛。将此法与免疫组化PAP法或ABC法联合使用,能成功地显示一些神...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸...,运用发光显影法提高了敏感性。Muh-legger等(1990)用地高辛(Digoxigenin)标记DNA,再用地高辛抗体连接碱性磷酸酶,催化发光底物金刚烷脱磷并发光,灵敏度与32P标记探针相同,而且32P、标记的DNA探针杂交膜需要在-70℃件下曝...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸...化的分子可用于生物素化的PCR产物的定量,如用生物素和地高辛双重标记的扩增产物可用微量滴定板法定量,将生物素和地高辛同时标记PCR产物的方法有三种途径:①在反应混合物中同时加入地高辛和生物素标记的脱氧核苷酸类...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;免疫学实验技术...谢,或具相同相似抗原性的其他药物及代谢物。如强心药地高辛、洋地黄毒甙、地高辛代谢物二氢地高辛,均可与地高辛抗体结合。显然,在体内几乎不发生代谢转化而原型排泄的药物,则较少代谢物干扰,尤其适用于免疫法检...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;临床生物化学...肽类激素如T3、T4、雌激素、皮质醇等。4.药物和毒品如地高辛、苯巴比妥、庆大霉素、吗啡等。
词条手术...处理4张切片。 10)每张切片使用30μl~60μl罗丹明抗-地高辛抗体或FITC卵白素,室温下孵育20min; 11)去掉塑料盖膜,把切片放入含1×PBS的染色缸。1×PBS室温下洗3次,每次2min。 扩增: 12)从1×PBS中取出切片,斜置...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...mRNA,同时显示了该mRNA所表达的蛋白质。新近Fischer等利用地高辛标记rRNA探针在Lowicryl-K4M包埋的切片进行杂交,然后以抗地高辛等抗体结合胶体金颗粒进行显示,以银显示法加强获得极为满意的定位。总之,电镜水平的原位分子...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸...位末端标记检测 采用末端脱氧核糖核酸转移酶(TDT)将地高辛偶联的d-UTP标记在凋亡细胞的DNA3’(-OH)末端,再与过氧化物酶标记的抗地高辛抗体孵育,DAB染色,苏木素复染。 1.4 DNA凝胶电泳分析 按文献[1]的方法...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...过氧化物酶标记测定法 原理:脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端,与dATP形成异多聚体,并可与连接了报告酶(过氧化物酶或碱性磷酸酶)的抗地...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;细胞学技术