酚氯仿抽提法

复制缺陷型鼠IL-3重组腺病毒的构建和鉴定

...293细胞出现细胞病变时取1ml培养液，经蛋白酶K消化、酚氯仿抽提、乙醇沉淀提取病毒DNA，采用上述IL-3编码读框PCR引物和腺病毒特有引物进行扩增。腺病毒特有引物序列如下：　　P1：5′-TCGTTTCTCAGCAGCTGTTG-3′　　P2：5′-CATCTGAACTCAA...

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大肠癌转移相关基因骨桥蛋白反义及正义真核表达质粒的构建

...50℃反应30min，75℃反应10min，置冰上结束反应。而后用酚氯仿抽提回收，用70%预冷乙醇洗净后，加TE溶解。再将pGEM-TEasy-OPN（201bp）酶切产物与pcDNA3.1（+）-EcoRI酶切产物用T4DNAligase连接，构建pcDNA3.1（+）-OPN（反应201bp）真核表达质...

参考资料资料库；在线期刊；中华现代外科学杂志；2004年第1卷第1期

用16SrRNA探针定量测定普氏立克次体在细胞内的繁殖量

...加入DNase2U，孵育37℃15分钟以降解模板DNA。反应毕，用酚/氯仿法纯化探针。最后将探针混悬于200μl无RNA酶双蒸水中,并通过三氯醋酸沉淀法测定32P-UTP的掺入率(Ri)：　　注：CPM即放射性强度　　5.RNA酶保护分析〔6-9〕：将不同量的...

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多发性硬化外周血单个核细胞IL-2及TGF-βmRNA表达研究

...育4h以激活单个核细胞。　　1.2.2　总RNA的获得：采用酚-氯仿抽提法提取。　　1.2.3　cDNA的获得：通过逆转录反应将总RNA变为cDNA。　　1.2.4　PCR：将已获得的cDNA作为模板，加入不同的引物(表1)进行PCR扩增，条件为：　　IL-2：95℃...

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淋病

...的1MTrispH7.0中和碱性裂解液。用Tris平衡酚提抽一次，酚—氯仿抽提一次，然后用无水乙醇或异丙醇沉淀DNA，提取的DNA溶于30μl蒸馏水或TE缓冲液中。②临床棉拭子标本的提取将贴有分泌物的棉拭子在2ml的无菌生理盐水中或PBS缓冲...

参考资料求医问药；疾病手册；皮肤性病科

淋病

...的1MTrispH7.0中和碱性裂解液。用Tris平衡酚提抽一次，酚—氯仿抽提一次，然后用无水乙醇或异丙醇沉淀DNA，提取的DNA溶于30μl蒸馏水或TE缓冲液中。②临床棉拭子标本的提取将贴有分泌物的棉拭子在2ml的无菌生理盐水中或PBS缓冲...

词条疾病

调心方有效部位对类AD大鼠大脑神经生长因子及其受体p75的影响

...置液氮保存备用。　　1.6.3.1总RNA抽提采用异硫氰酸胍/酚/氯仿抽提法提取组织总RNA，紫外分光光度计260/280nm测RNA浓度，在甲醛-MOPS凝胶电泳缓冲液中1%琼脂糖凝胶电泳鉴定RNA质量。　　1.6.3.2逆转录反应GIBCOBRL公司的M-MLV逆转录酶，...

参考资料医源资料库；在线期刊；中华现代中西医杂志；2005年第3卷第18期

川崎病患者外周血淋巴细胞凋亡减少的初探

...SIGMA公司)0.5ml溶解细胞，离心取上清，用饱和酚(pH＞7.8)及氯仿、异戊醇(24∶1)抽提，加无水乙醇，-20℃过夜。70%乙醇洗涤后，RNaseA(20μg/ml，北京华美公司)去除RNA，1%琼脂糖凝胶电泳，紫外灯透照下观察片段DNA梯度，并照相记录。...

参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学

甲状腺乳头状癌组织中TSHR基因启动子甲基化研究

...法　　121组织DNA的提取采用常规的蛋白酶K消化、酚/氯仿/异戊醇抽提和乙醇沉淀法，TE溶解后用紫外分光光度计定量。A260/A280均介于17～20之间，-20℃保存备用。　　122DNA的亚硫酸氢盐修饰取1μgDNA按修饰试剂盒说明...

参考资料医源资料库；在线期刊；中华现代内科学杂志；2009年第6卷第5期

汉语阅读障碍儿童DYX1C1基因多态性研究

...。　　1.2.2基因多态性分析　　1.2.2.1DNA提取采用标准酚－氯仿抽提法从口腔上皮细胞中提取基因组DNA。测定260nm和280nm光密度值，计算DNA浓度和纯度。　　1.2.2.2基因分型采用聚合酶链式反应－限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）分...

参考资料医源资料库；在线期刊；中国学校卫生；2008年第28卷第5期

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