...、设备及试剂 一、材料 外源DNA片段:自行制备的带限制性末端的DNA溶液,浓度已知;载体DNA:pBS质粒(Ampr,lacZ),自行提取纯化,浓度已知;宿主菌:E.coliDH5α,或JM系列等具有α-互补能力的菌株。 二、设备 恒温摇床...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...的结合位点位于模板上B1(B2)结合位点的5‘侧。 2.1制备单链DNA模板用热解链法制备单链DNA模板可避免影响SDA体系的pH。其它制备方法如酶解链法未见报道。该阶段实际上只是在为SDA准备模板。 2.2两端带酶切位点的目的DN...
参考资料合作平台;医学论文;基础医学论文;生物化学...样对典型的凋亡DNA梯状样的影响大大减少。图1 3种方法制备SEB诱导CD4+T细胞凋亡片段化DNA的比较 Fig1 Comparisonofthreemethodsforthepreparation ofCD4+TcellapoptoticDNAfragmentsbySEB A:M:DNAMarker(λDNA/EcoRⅠ+HindⅢ);1:4h;2:8h...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...录电泳结果(拍照时,凝胶旁放一尺子)。 3)杂交用胶的制备(做以下步骤两组合一) A.将凝胶浸没入30mL0.25mol/LHCl溶液中15min,使DNA脱嘌呤。 B.用蒸馏水短暂洗凝胶2次。 C.将凝胶浸没入30mL变性液中30min,使凝胶变性。...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...胰RNA酶),振荡,贮存于-20℃。 (二)质粒DNA的大量制备 (1)同上1.(1) (2)将1ml含菌液倒入含相应抗生素的Lb100ml中,37℃振荡培养至A590=1.0(5~6h)。 (3)加氯霉素(170μg/ml)扩增,37℃温箱中培养过夜。 ...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...样品中发现有多种污染物会抑制PCR。一些在标准基因组DNA制备中使用的试剂,如SDS,在浓度低至0.01%时就会抑制扩增反应。)所需的最佳模板量取决于基因组的大小。你的目的片段在基因组中占多少?至少要保证模板中含有一...
词条手术...b,Cloning,Sequenceanalysis 本研究利用PCR技术,选取本室制备的分泌抗人C1qMcAb的B6杂交瘤细胞株进行可变区(Ⅴ区)基因的克隆、测序,为探讨Ⅴ基因的作用及进一步研制抗人C1q小抗体提供有益的指导。结果利用合成的一对IgVH...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学体外制备 1.化学合成 许多国外公司都可以根据用户要求提供高质量的化学合成siRNA。主要的缺点包括价格高,定制周期长,特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高,为一个基因合成3—4对siRNAs的成本就更高了,比较...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...果准确性的因素做一总结。1液化痰液的方法及DNA模板的制备方法应用PCR法检测痰液中结核分支杆菌时,痰液充分液化除去抑制PCR反应的物质是检测成功与否的关键因素之一,因此选择合适的结核杆菌DNA模板提取纯化方法是非常...
参考资料合作平台;在线期刊;中华医学研究杂志;2004年第4卷第1期;综述... (2)分光光度法对于很多DNA提取物包括质粒小量制备来说,并不能给出一个可信的DNA浓度估计,混杂的染色体DNA、蛋白、RNA、有机物及无机化合物均可能有260nm光吸收。因此,分光光度法常常错误地高估DNA浓度。 ...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术