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  • 重组质粒的连接、转化及筛选

    ...、设备及试剂     一、材料  外源DNA片段:自行制备带限制性末端DNA溶液,浓度已知;载体DNA:pBS质粒(Ampr,lacZ),自行提取纯化,浓度已知;宿主菌:E.coliDH5α,或JM系列等具有α-互补能力菌株。  二、设备  恒温摇床...

    参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术
  • 链置换扩增术(SDA)及其进展

    ...结合位点位于模板上B1(B2)结合位点5‘侧。  2.1制备单链DNA模板用热解链法制备单链DNA模板可避免影响SDA体系pH。其它制备方法如酶解链法未见报道。该阶段实际上只是在为SDA准备模板。  2.2两端带酶切位点DN...

    参考资料合作平台;医学论文;基础医学论文;生物化学
  • 一种快速分离细胞凋亡片段化DNA的简单方法——NP-40法

    ...样对典型凋亡DNA梯状样影响大大减少。图1 3种方法制备SEB诱导CD4+T细胞凋亡片段化DNA比较  Fig1 Comparisonofthreemethodsforthepreparation  ofCD4+TcellapoptoticDNAfragmentsbySEB  A:M:DNAMarker(λDNA/EcoRⅠ+HindⅢ);1:4h;2:8h...

    参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学
  • Southern杂交鉴定

    ...录电泳结果(拍照时,凝胶旁放一尺子)。  3)杂交用胶制备(做以下步骤两组合一)  A.将凝胶浸没入30mL0.25mol/LHCl溶液中15min,使DNA脱嘌呤。  B.用蒸馏水短暂洗凝胶2次。  C.将凝胶浸没入30mL变性液中30min,使凝胶变性。...

    参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术
  • DNA重组实验中常用的技术

    ...胰RNA酶),振荡,贮存于-20℃。  (二)质粒DNA大量制备  (1)同上1.(1)  (2)将1ml含菌液倒入含相应抗生素Lb100ml中,37℃振荡培养至A590=1.0(5~6h)。  (3)加氯霉素(170μg/ml)扩增,37℃温箱中培养过夜。  ...

    参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术
  • PCR实验技术

    ...样品中发现有多种污染物会抑制PCR。一些在标准基因组DNA制备中使用试剂,如SDS,在浓度低至0.01%时就会抑制扩增反应。)所需最佳模板量取决于基因组大小。你片段在基因组中占多少?至少要保证模板中含有一...

    词条手术
  • 抗人C1q杂交瘤细胞中一未知DNA片段的克隆与分析

    ...b,Cloning,Sequenceanalysis  本研究利用PCR技术,选取本室制备分泌抗人C1qMcAbB6杂交瘤细胞株进行可变区(Ⅴ区)基因克隆、测序,为探讨Ⅴ基因作用及进一步研制抗人C1q小抗体提供有益指导。结果利用合成一对IgVH...

    参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学
  • siRNA的制备

    体外制备  1.化学合成  许多国外公司都可以根据用户要求提供高质量化学合成siRNA。主要缺点包括价格高,定制周期长,特别是有特殊需求。由于价格比其他方法高,为一个基因合成3—4对siRNAs成本就更高了,比较...

    参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术
  • 影响结核杆菌PCR结果准确性的因素

    ...果准确性因素做一总结。1液化痰液方法及DNA模板制备方法应用PCR法检测痰液中结核分支杆菌时,痰液充分液化除去抑制PCR反应物质是检测成功与否关键因素之一,因此选择合适结核杆菌DNA模板提取纯化方法是非常...

    参考资料合作平台;在线期刊;中华医学研究杂志;2004年第4卷第1期;综述
  • 测序技术

    ...   (2)分光光度法对于很多DNA提取物包括质粒小量制备来说,并不能给出一个可信DNA浓度估计,混杂染色体DNA、蛋白、RNA、有机物及无机化合物均可能有260nm光吸收。因此,分光光度法常常错误地高估DNA浓度。    ...

    参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术

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