...NaCl，0.4%SDS，1.0mg/ml蛋白酶K）37℃下处理过夜;且等体积酚/氯仿(1:1)，氯仿/异戊醇（24:1）各抽提2次；加1/10体积3mol/LNaAc（pH5.2）及2.5倍体积无水乙醇置-20℃2h或过夜沉淀DNA；加1体积乙醇洗涤1次；用60μl含RNA酶(100μg/ml)的TE液(10mmol/LTr...
参考资料求医问药；疾病手册；皮肤性病科...NaCl，0.4%SDS，1.0mg/ml蛋白酶K）37℃下处理过夜;且等体积酚/氯仿(1:1)，氯仿/异戊醇（24:1）各抽提2次；加1/10体积3mol/LNaAc（pH5.2）及2.5倍体积无水乙醇置-20℃2h或过夜沉淀DNA；加1体积乙醇洗涤1次；用60μl含RNA酶(100μg/ml)的TE液(10mmol/LTr...
词条疾病...reS基因），同上步条件扩增［4，5］。PCR产物加等体积酚:氯仿抽提，乙醇沉淀DNA。 1.4重组质粒的构建 分别以限制性内切酶HindIII酶切PCR产物SP和SPP片段，以低熔点纯化回收。同时HindIII酶切质粒pcDNA3和pSV2并以磷酸酶去磷酸...
参考资料合作平台；在线期刊；中华医药杂志；2004年第4卷第8期；论著...酶，使终浓度为2％的SDS，放60°C水浴15min。用等体积酚／氯仿·异戊醇（体积之比为3/1）抽提二次后，再用等体积氯仿/异戊醇（体积之比为24/1）和等体积乙醚各抽提一次。水相在pH7.8,10mmol/LTris-HCI,1mmol/LED-TA中透析4°C过夜。透析后...
参考资料医源资料库；医源图书馆；教材类；中国幽门螺杆菌研究...0%SDS、蛋白酶K，50℃孵育2h，再加入RNaseA室温放置1h。酚、氯仿抽提，取10μlDNA，70℃放5min后，15ｇ/Ｌ琼脂糖凝胶，4V/cm电泳3h，观察结果并照像保存。 1.4RT-PCR检测SurvivinmRNA表达变化收集上述各组细胞收集1×106个细胞，提取总RNA...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华医学实践杂志；2006年第5卷第8期...g/mlRNase，37℃，30分钟保温。加等量的phenol（酚）/CIAA(480ml氯仿，20ml异戊醇)，混匀。4℃，10000rpm，离心5分钟。取上层液加酚/CIAA重复一次。取上层液加1/10体积5mol/lNaCl和2倍无水乙醇，―20℃过夜或―70℃2小时以上。4℃，10000rpm，...
参考资料药品天地；专业药学；实验技术；基本实验技术；实验技术...g/mlRNase，37℃，30分钟保温。加等量的phenol（酚）/CIAA(480ml氯仿，20ml异戊醇)，混匀。4℃，10000rpm，离心5分钟。取上层液加酚/CIAA重复一次。取上层液加1/10体积5mol/lNaCl和2倍无水乙醇，―20℃过夜或―70℃2小时以上。4℃，10000rpm，...
参考资料医源资料库；医源图书馆；教材类；临床生物化学...ris-Hcl；10mMEDTA，0.1%SDS；200ug/ml蛋白酶K)65℃冰浴3小时，酚/氯仿抽提，取上清，加入1/10体积5M的NaAC(PH52)，用2倍无水乙醇沉淀，-20℃过夜，12000rpm离心10分钟，弃上清，自然晾干，加入20ul三蒸水溶解。3PCR扩增与鉴定：PCR的反...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...属同意后每个入组者抽取静脉血5ml(肝素抗凝)，用常规酚-氯仿法抽提基因组DNA，-70℃冰箱保存备用。 1.2.2聚合酶链反应-限制性片断长度多态性分析 用PE9700型热循环仪进行DNA扩增,反应体积25μl,其中：kcl(1.25mmol/ml)1μl，Mg...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国民康医学；2007年第19卷第5期...0.5ml、20mg/ml蛋白酶K25μl、混匀，37℃水浴消化过夜后，酚/氯仿法常规抽提DNA，-20℃保存备用。1.2.2主要实验步骤（1）高危型HPV-触减PCR（touchˉdownPCR）反应:对146例宫颈标本进行定性检测，按参考文献［1］设计的引物A、B在HPVE6-E7基...
参考资料合作平台；在线期刊；中华实用医药杂志；2004年第4卷第18期；论著