...克隆到pXF3H载体的EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点以构建真核表达质粒;以ayw亚型HBV全长质粒构建具有复制能力的1.3倍HBV质粒(pHBV1.3)。不同剂量的APOBEC3G真核表达质粒与pHBV1.3共转染HepG2细胞;酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液的乙型肝炎...
参考资料行业资讯;临床快报;肝胆病(一)聚乙二醇沉淀法质粒DNA 这里介绍的方法(R.Tresman,个人通讯)已卓有成效地用于纯化碱裂解法制备的质粒DNA。 1)将核酸溶液[上页步骤9)所得]转入15mlCorex管中,再加3ml用冰预冷的5mol/LLiCl溶液,充分混...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...Nogo-c真核表达载体。 1材料与方法 1.1材料与试剂质粒pcDNA3.1购自Invitrogen公司;大肠埃希菌DH5α由本室保存;总RNA提取Trizol试剂为Gib-co公司产品;全自动测序由博亚公司完成;限制性内切酶、T4DNA连接酶、RT-PCRKit均为TakaRa公司产品...
参考资料合作平台;在线期刊;中华医学研究杂志;2004年第4卷第12期;论著...TLR2、4)的表达及细胞增殖的影响。方法已构建pBlueScript-HBV质粒并经测序,转化宿主菌,摇菌后提取质粒,用Sapl酶切,获得HBV3.2kb基因组,采用脂质体瞬时转染肝癌细胞株HepG2,IMX检测HBV所分泌抗原,台盼蓝计数检测细胞增殖活...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第3期...要讲述常用而基本的分子生物学实验技术。它的内容包括质粒DNA的制备;DNA的重组;基因的转化及表达;核酸的序列分析以及生物大分子印迹技术等等。特点之二是增加了新内容。在原有的基础上增设了双向电泳、脉冲电泳及毛...
参考资料医源资料库;医源书店;基础医学...在真核细胞中表达的研究。 1 材料与方法 1.1 质粒 pBX-hFASL,含hFASLcDNA,由日本东京大学惠赠;PSVL,真核细胞瞬时高效表达载体,本室保存。 1.2 试剂和试剂盒 WizardTMMaxiprepsDNAPurificationSystem,用于提取转染细胞用的质粒...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...法获得目的基因,插入到pBVIL1载体中,构建pBVIL1/TpN47表达质粒。将新获得的TpN47基因与本研究室保存的TpN15、TpN17、TpN44.5基因片段相连接,进行嵌合表达,经纯化后用双抗原夹心法测其活性。结果经改进的重组梅毒螺旋体多表位...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医学研究杂志;2006年第6卷第12期...胞出现基因变异或引发癌症。在最新实验中,研究团队用质粒取代病毒,将基因插入血细胞内。质粒是染色体外的DNA(脱氧核糖核酸)环,可在细胞内简短复制,之后会降解。研究小组提取了一些脐带血细胞,先用生长因子对其...
参考资料行业资讯;临床快报;克隆与干细胞研究...及其应用打下基础。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1质粒、菌株与细胞系 E.coliDH5α菌株和E.coliBL21菌株为本实验室保存;HepG2细胞来自四川大学国家重点实验室。 1.1.2试剂与仪器 异丙基硫代βD半乳糖苷(IPTG),蛋...
参考资料医源资料库;在线期刊;成都医学院学报;2010年第5卷第3期...表达奠定实验基础。 1 材料与方法 1.1 材料 质粒和菌株:E.coliDH5α和pCRTMII本室保存,pBV220质粒由张智清教授惠赠。工具酶:实验所用工具酶购自华美生物工程公司和Promega公司。生化试剂:溴化己锭(EB)和过硫酸铵等购...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学