...(DHBV)复制的抑制作用。研究者从健康人外周血单个核细胞提取RNA,逆转录聚合酶链反应扩增APOBEC3G,将产物克隆到pXF3H载体的EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点以构建真核表达质粒;以ayw亚型HBV全长质粒构建具有复制能力的1.3倍HBV质粒(pHBV1.3)...
参考资料行业资讯;临床快报;肝胆病...只有在质粒复制达到极高水平时才会出现,只要将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现负荷,可收集整个DNA区高水平时才会出现,只要产将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现超负荷,可收集整个DNA区...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...pcDNA3.1购自Invitrogen公司;大肠埃希菌DH5α由本室保存;总RNA提取Trizol试剂为Gib-co公司产品;全自动测序由博亚公司完成;限制性内切酶、T4DNA连接酶、RT-PCRKit均为TakaRa公司产品;其他生化试剂均为国产分析纯。 1.2总RNA的提取细胞用Trizol...
参考资料合作平台;在线期刊;中华医学研究杂志;2004年第4卷第12期;论著...法已构建pBlueScript-HBV质粒并经测序,转化宿主菌,摇菌后提取质粒,用Sapl酶切,获得HBV3.2kb基因组,采用脂质体瞬时转染肝癌细胞株HepG2,IMX检测HBV所分泌抗原,台盼蓝计数检测细胞增殖活性,直接免疫荧光流式细胞术(FCM)检测...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第3期...辛勤劳作的成果汇编。作者简介:目录:实验1质粒DNA的提取、酶切与鉴定实验2大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA分子导入原核细胞实验3DNA重组实验4植物基因转化实验5有ExoⅢ外切酶构建亚克隆实验6PCR基因扩增实验7噬菌斑的...
参考资料医源资料库;医源书店;基础医学... 1.2 试剂和试剂盒 WizardTMMaxiprepsDNAPurificationSystem,用于提取转染细胞用的质粒DNA,购自Promega公司;所用限制性内切酶购自国内外各公司。 1.3 FASL表达载体的构建 用XbaI内切酶将hFASLcDNA从pBX-hFASL质粒上切出,与经同样酶切并经...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...林用于配制LB培养基的胰化蛋白胨(bacto-tryptone)及酵母提取物(bacto-yeast)购自本院条件处。1.1.3引物、序列测定由奥科生物技术有限公司合成,三博远志公司测序。1.1.4梅毒参考品(panel)中国药品生物制品检定所提供。1.2方法1.2....
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医学研究杂志;2006年第6卷第12期...核酸)环,可在细胞内简短复制,之后会降解。研究小组提取了一些脐带血细胞,先用生长因子对其进行处理,然后用电脉冲在细胞的表面凿出微小的孔洞,运载着4个基因的质粒可以通过这些孔洞滑入细胞内。一旦进入细胞,...
参考资料行业资讯;临床快报;克隆与干细胞研究...表达人细胞核输入蛋白α(Importinα),制备多克隆抗体。方法提取人肝癌细胞HepG2中的总RNA,RTPCR法扩增Importinα基因。构建pGEX6P1Importinα融合表达载体,转化大肠埃希菌BL21,以异丙基硫代βD半乳糖苷(IPTG)诱导表达GSTImportinα...
参考资料医源资料库;在线期刊;成都医学院学报;2010年第5卷第3期...特异蛋白分子量pBV-gag为57kD和47kD;pBV-gag’为47kD和21kD。经提取包涵体证明,表达的蛋白主要以包涵体形式存在于菌体中。结论:HIV-2gag非融合蛋白可在大肠杆菌中获得表达并主要以包涵体形式存在。 中国图书分类号 R512.91Exp...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学