...大生物公司产品。限定性内切酶均购自美国BioLabs公司。引物由北京三博生物技术公司合成。DNA测序由上海博亚公司采用ABI310全自动DNA测序仪完成。 1.2方法 1.2.1小鼠SLC基因的克隆根据GenBank小鼠SLC基因序列设计特异性引物...
参考资料合作平台;在线期刊;中华医学实践杂志;2004年第3卷第11期;论著...法抽提。 1.4PCR扩增TTVDNA[6] 用半巢式PCR,第1轮引物用NG0635’-CTGGCATTT-TACCATTTCCAAAGTT,第2轮引物用NG0615GGCAACATGTTATGGATAGACTGG和NG063。第2轮PCR反应条件:取模板3μl,10×PCR反应缓冲液3μl,dNTP各200μmol/L,NG059/NG063各15pmol,TaqDNA多...
参考资料合作平台;在线期刊;中华医药杂志;2004年第4卷第8期;论著...照试剂盒说明书提取细胞总RNA。 1.3RT-PCR扩增cDNA序列以引物扩增片段cDNA。引物具体序列为5′-AAGCTTATGGACGGACAGAAGAAAC-3′5′-GAATTCTCAATCTGCTTTGCGCTTC-3′,在5′端设计时引入了限制性酶切位点(HindⅢ和EcoRI),参照TaKaRaone-stepRNAPCRkit试剂...
参考资料合作平台;在线期刊;中华医学研究杂志;2004年第4卷第12期;论著...mg/L),置-4℃冰箱保存。 1.2.2PCR反应 用AS-PCR方法,引物设计由北京赛百盛基因技术有限公司合成。引物序列见表1。公用上游引物F分别与R1、R2两个下游引物组成两对引物,在两个反应体系对同一模板进行平行扩增。PCR反应...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第10期...20℃低温保存;用常规酚-氯仿抽提法提取基因组DNA。1.2PCR引物合成由于编码热休克转录因子(heat-shocktranscriptionfactor4,HSF4)基因定位于16q21-q22.1;因此选择了D16S539分子标记,首先进行连锁分析。其上下游引物序列分别如下:STR16F:...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华现代眼科学杂志;2006年第3卷第4期...司),限制性内切酶、Taq酶、T4连接酶(美国Promega公司),PCR引物(上海Sigma生物制品公司),碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(武汉博士德试剂公司),骨钙素(OC)检测试剂盒(北京东亚免疫技术研究所),重组增强型绿色荧光蛋白基因的腺相关...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国矫形外科杂志;2008年第16卷第20期...纯化试剂盒为QiaGen公司产品;测序试剂盒为ABI公司产品;PCR引物委托上海生工生物工程公司合成。1.3药敏实验及最低抑菌浓度(MIC)测定采用Kirby-Bauer法进行药物敏感性检测,E-试验进行MIC值检测。药敏判断及ESBLs表型筛选和确认标...
参考资料合作平台;在线期刊;中华医学研究杂志;2004年第4卷第7期;论著... 室保存。 1.2 酶和试剂 Trizol试剂购自GIBCO/BRL,引物经由上海生工合成,TaqDNA聚合酶、纯化质粒DNA所用的试剂盒(Wizard)、DNA回收试剂盒购自Promega公司,逆转录酶、RNase、T4连接酶及限制性核酸内切酶购自大连宝泰克公司,TC-...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...胞介素18(hIL-18)的原核高效表达系统。方法设计特异性引物,以RT-PCR从外周血单个核细胞中扩增出人白细胞介素18成熟肽片段,克隆进入PBV220载体。以DNAWORK软件和RNADRAW软件进行RNA结构和自由能优化;通过合成寡核苷酸和ove...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医药杂志;2007年第7卷第9期...icum,Sj)候选抗原基因。方法以Sj雄虫成虫DNA为模板,设计引物扩增并纯化特异性片段,构建pBS-T克隆载体,将其克隆入大肠杆菌DH5α菌株,筛选阳性克隆,初步进行菌落PCR鉴定后测序,与EBI数据库中的已知序列比对分析,并用蛋...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2007年第7卷第7期