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  • 中国部分地区耐利福平和异烟肼耐药基因的检测

    ....2细菌DNA的制备采用经典酶解,临床分离株DNA用常规/氯仿抽提提取-20℃保存备用。  1.3引物PCR扩增引物由中国科学院微生物所合成。  1.4PCR扩增采用25μl反应体系,4XdNTPs终浓度为0.2mmol/L,引物终浓度为0.2μmol/L,扩增...

    参考资料合作平台;在线期刊;中华医学研究杂志;2004年第4卷第8期;论著
  • 端粒酶活性检测方法的研究进展

    ...制物的影响,许多学者在得到端粒酶延伸产物后进行-氯仿-异戊醇(25:24:1)抽提,酒精沉淀纯化[14,15]。  5端粒酶活性的半定量检测  由于端粒酶活性在少数正常组织细胞中有微弱的表达,而且与细胞的增殖活跃程度、肿...

    参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学
  • 雷公藤甲素抑制IL-5介导的人嗜酸性粒细胞存活延长作用及其机制研究

    ...10%SDS),37℃过夜。加入等体积饱和抽提。加入等体积的氯仿:异戊醇(24∶1)再抽提。取上清,加入1/10体积3mol/LNaAc和2.5倍体积的无水乙醇,混匀置-70℃10min。10000g离心沉淀DNA,70%乙醇洗涤。样品DNA与上样缓冲液混匀,在含有10μg/...

    参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学
  • 肾综合征出血热患者软腭粘膜对乳鼠致病性的研究

    ...S液消化(蛋白酶K,100μg/ml;SDS,0.5%)37℃温育30分钟。采用-氯仿提取RNA[7]。  1.4 套式聚合酶链式反应(Nested-PCR) Nested-PCR试剂盒购于第四军医大学基因诊断技术应用研究所。第1对引物:(1)5′-GAGATGATCATCAGGTTCAA-3′,(2)5′-GTGA...

    参考资料合作平台;医学论文;基础医学论文;微生物学
  • 从人源单链抗体库中筛出具有抗原结合活性的重链可变区和更小抗体片段

    ...化,溶于1mlH2O中,PEG/NaCl再沉淀一次,溶于0.5mlH2O中,氯仿分别抽提一次,最后用酒精沉淀噬菌体单链DNA(ssDNA)。ssDNA溶于10μlH2O中,其中2μl用于测A260nm和A280nm值,其余用于测序。  1.3 噬菌体抗体克隆测序 测序引物为5′HO-GA...

    参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学
  • 抑制消减杂交技术筛选肺炎链球菌多耐药相关DNA片段

    ...别将多耐药菌株09062407和ATCC49619基因组DNA用RsaⅠ酶切,/氯仿抽提,无水乙醇沉淀,调整DNA浓度为300ng/μl备用,酶切效果良好方可进行后续实验。抑制消减杂交采用PCR选择性细菌基因组消减试剂盒,实验所用接头及引物见表1。...

    参考资料医源资料库;在线期刊;成都医学院学报;2010年第5卷第4期
  • MTHFR基因多态性和酗酒与缺血性脑卒中的相关性

    ...低渗破红细胞,分离白细胞,经SDS和蛋白酶K消化,/氯仿抽提,无水乙醇沉淀提取基因组DNA。  1.2.2MTHFR基因型检测引物序列:P1:5’-TGAAGGAGAAGGTGTCTGCGGGA-3’;P2:5’-AGGACGGTGCGGTGAGAGTG-3’(上海生工),PCR反应体...

    参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第6期
  • 抗Fas抗体诱导人肾小球系膜细胞凋亡

    ...DTA,1%SDS,200μg/ml蛋白酶K)充分混匀,37℃孵育12h后按传统-氯仿-异戊醇抽提DNA方[5],收集Mcs的DNA,在1.6%凝胶中160mV电泳2h后,观察DNA条带分布情况。Mcs细胞凋亡率、McsDNA片段化率用  2 结果  形态学观察表明抗Fas抗体能...

    参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学
  • 肠球菌随机扩增多态性DNA分型及应用研究

    ...基中,35℃恒温摇床过夜,取1.5ml菌液离心收取菌体,氯仿抽提后DNA,分光光度测定抽提后DNA的纯度,A260/A280为1.82~1.98之间,符合DNA样品要求,置-20℃冰箱保存备用。    1.3RAPD反应体系条件的优化  1.3.1引物的设计...

    参考资料医源资料库;在线期刊;中华医学研究杂志;2005年第5卷第7期
  • 第二节 支原体性感染症

    ...NaCl,100mmol/LEDTA,pH8.0),置37℃裂解60min,沸水5min,氯仿抽提DNA乙醇沉淀,沉淀物溶于20μlTE缓冲液(100mmol/LTris-HCl,1mmol/LEDTA,pH8.0)。  (2)引物设计  引物来源于解脲脲原体,脲酶基因序列:  UU1:CAGATACATTAAACGAAGCAGG...

    参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;基因诊断与性传播疾病

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