....2细菌DNA的制备采用经典酶解法，临床分离株DNA用常规酚/氯仿抽提法提取-20℃保存备用。 1.3引物PCR扩增引物由中国科学院微生物所合成。 1.4PCR扩增采用25μl反应体系，4XdNTPs终浓度为0.2mmol/L，引物终浓度为0.2μmol/L，扩增...
参考资料合作平台；在线期刊；中华医学研究杂志；2004年第4卷第8期；论著...制物的影响，许多学者在得到端粒酶延伸产物后进行酚-氯仿-异戊醇（25:24:1）抽提，酒精沉淀纯化[14,15]。 5端粒酶活性的半定量检测 由于端粒酶活性在少数正常组织细胞中有微弱的表达，而且与细胞的增殖活跃程度、肿...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...10%SDS)，37℃过夜。加入等体积饱和酚抽提。加入等体积的氯仿：异戊醇(24∶1)再抽提。取上清，加入1/10体积3mol/LNaAc和2.5倍体积的无水乙醇，混匀置-70℃10min。10000g离心沉淀DNA，70%乙醇洗涤。样品DNA与上样缓冲液混匀，在含有10μg/...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...S液消化(蛋白酶K，100μg/ml;SDS,0.5%)37℃温育30分钟。采用酚-氯仿法提取RNA［7］。 1.4 套式聚合酶链式反应(Nested-PCR) Nested-PCR试剂盒购于第四军医大学基因诊断技术应用研究所。第1对引物：(1)5′-GAGATGATCATCAGGTTCAA-3′，(2)5′-GTGA...
参考资料合作平台；医学论文；基础医学论文；微生物学...化，溶于1mlH2O中，PEG/NaCl再沉淀一次，溶于0.5mlH2O中,酚、氯仿分别抽提一次，最后用酒精沉淀噬菌体单链DNA(ssDNA)。ssDNA溶于10μlH2O中,其中2μl用于测A260nm和A280nm值，其余用于测序。 1.3 噬菌体抗体克隆测序 测序引物为5′HO-GA...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...别将多耐药菌株09062407和ATCC49619基因组DNA用RsaⅠ酶切，酚/氯仿抽提，无水乙醇沉淀，调整DNA浓度为300ng/μl备用，酶切效果良好方可进行后续实验。抑制消减杂交采用PCR选择性细菌基因组消减试剂盒，实验所用接头及引物见表1。...
参考资料医源资料库；在线期刊；成都医学院学报；2010年第5卷第4期...低渗法破红细胞，分离白细胞，经SDS和蛋白酶K消化，酚/氯仿抽提，无水乙醇沉淀提取基因组DNA。 1.2.2MTHFR基因型检测引物序列：P1：5’-TGAAGGAGAAGGTGTCTGCGGGA-3’；P2：5’-AGGACGGTGCGGTGAGAGTG-3’（上海生工），PCR反应体...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2008年第8卷第6期...DTA,1%SDS,200μg/ml蛋白酶K)充分混匀，37℃孵育12h后按传统酚-氯仿-异戊醇抽提DNA方法［5］，收集Mcs的DNA，在1.6%凝胶中160mV电泳2h后，观察DNA条带分布情况。Mcs细胞凋亡率、McsDNA片段化率用 2 结果 形态学观察表明抗Fas抗体能...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...基中，35℃恒温摇床过夜，取1.5ml菌液离心收取菌体，酚氯仿法抽提后DNA，分光光度法测定抽提后DNA的纯度，A260/A280为1.82～1.98之间，符合DNA样品要求，置-20℃冰箱保存备用。 1.3RAPD反应体系条件的优化 1.3.1引物的设计...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华医学研究杂志；2005年第5卷第7期...NaCl，100mmol/LEDTA，pH8.0），置37℃裂解60min，沸水5min，酚，氯仿抽提DNA乙醇沉淀，沉淀物溶于20μlTE缓冲液(100mmol/LTris-HCl，1mmol/LEDTA，pH8.0)。 （2）引物设计 引物来源于解脲脲原体，脲酶基因序列： UU1：CAGATACATTAAACGAAGCAGG...
参考资料医源资料库；医源图书馆；教材类；基因诊断与性传播疾病