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  • 梅毒螺旋体青霉素结合蛋白的克隆及表达

    ...重组技术，扩增重编码青霉素结合蛋白的基因，构建重组质粒pETJKM/TpN47，IPTG诱导表达。结果PCR法扩增出了1350bp的目的片段，原核表达质粒pETJKM/TpN47酶切鉴定正确，测序结果与Gengbank上公布的基因序列完全一致，并可在大肠杆菌中...

    参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2008年第8卷第5期
  • 丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶基因的克隆和表达

    ...NA,Sanger双脱氧链终止法测定其序列，与pBV220载体构建重组质粒，在大肠杆菌中表达，SDS-PAGE和Westernblot分析重组蛋白。结果　用RT-PCR方法扩增得到了HCV丝氨酸蛋白酶基因，序列分析表明其读码框架正确，丝氨酸蛋白酶活性中心高...

    参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学
  • Megalin基因片段（3189-4169）的克隆及其表达

    ...T-PCR获得大鼠肾目的片段Megalin基因3189-4169，再与原核表达质粒pTrcHisA结合构建重组质粒，然后将重组质粒转入TOP10细菌诱导表达融合蛋白，最后用Western-Blot检测表达的融合蛋白。结果（1）RT-PCR获得的目的片段大小为1kb，测序证实...

    参考资料医源资料库；在线期刊；中华现代临床医学杂志；2006年第4卷第8期
  • 视黄酸对CDK2组成性表达HL—60细胞增殖的影响

    ...CDK2表达的变化。　　1材料与方法　　1.1细胞株的培养与质粒的提取、鉴定HL—60(人早幼粒细胞白血病)细胞株由北京医科大学血液病研究所提供。细胞在含10％热灭活小牛血清的RPMI1640培养液中常规传代。带Sra启动子的CDK2表达质...

    参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学
  • 重组BMP4/7融合基因腺相关病毒的构建及其对兔骨髓基质干细胞生物学行为的影响

    ...织中克隆BMP4和BMP7成熟肽cDNA，获取BMP4/7融合基因，克隆到质粒pGEM质粒中；（2）从pGEMBMP4/7质粒中切取BMP4/7融合基因克隆到穿梭质粒，在大肠杆菌内重组，在293细胞中构建AAVBMP4/7重组腺相关病毒载体；（3）不同MOI值的AAVBMP4/...

    参考资料医源资料库；在线期刊；中国矫形外科杂志；2008年第16卷第20期
  • 人内皮抑素克隆表达及对血管内皮细胞生长的抑制作用

    ...atin全基因。用原核细胞表达载体构建了pBV220/endostatin重组质粒，经DNA测序确认后，将其转化大肠杆菌DH5α进行表达、初步纯化及活性测定。结果　经SDS-PAGE分析，表达产物相对分子质量(Mr)约20×103，薄层扫描显示表达产物可达细菌...

    参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学
  • 结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的表达及纯化研究

    ...及疫苗研究中的应用奠定基础。　　1材料与方法　　1.1质粒和宿主菌pMD18-T载体购自大连宝生物工程公司。表达载体pGEX-6P-1、大肠杆菌JM109和DH5a株为海南大学生命科学和农学院作物遗传育种实验室保存。　　1.2结核菌标准株H37Rv...

    参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2008年第8卷第6期
  • 弓形虫依钙蛋白激酶Calpain-like的克隆及生物学特性

    ...yMiniKit）、反转录试剂盒购自Invitrogen公司；TaqDNA聚合酶、质粒抽提试剂盒购自天根生化公司；dNTP,PCR产物纯化试剂盒购自Promega公司；核酸共沉剂、EcoRⅠ、BamHⅠ限制性内切酶和PCRmarker购自Takara公司；RNALadder购自晶美公司；DIG探针...

    参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2008年第8卷第4期
  • 重组抗原检测抗干燥综合征A抗原的自身抗体

    ...材料　　1.人肝λgt11cDNA文库（R.W.Davis博士赠送）；PGEX-2T质粒，JM109菌株(ZRLian博士赠送)　　2.标准抗SSA-60000阳性血清由美国疾病控制中心提供。患者血清来自本院1994年8月至1997年8月收治的住院患者，其中SLE60例、SS20例。所有患者...

    参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学
  • 大鼠骨骺干细胞的分离鉴定及其永生化细胞株的构建

    ...用电穿孔转染技术将含有猿肾病毒40大T抗原基因(SV40Tag)的质粒pCMVSV40T／PUR转染骨骺干细胞，经嘌呤霉素筛选，抗性克隆扩大培养。应用FGFR-3抗体和PCNA抗体进行免疫细胞化学染色，观察细胞的形态及其生长状况并绘制细胞生长曲...

    参考资料医源资料库；在线期刊；中国矫形外科杂志；2007年第15卷第16期

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