...转化BJ5183高效感受态菌。克隆质粒再转化DH5(感受态菌，提取质粒，PacI酶切鉴定。提取重组腺病毒质粒pAdflagAWP15ug，用PacⅠ酶切线性化。按照lipofectAMINE(Gibco公司)使用说明书操作，将线性化的质粒pAdflagAWP1转染293细胞，24h...
参考资料医源资料库；在线期刊；局解手术学杂志；2010年第19卷第5期...氨苄青霉素的LB培养液进行质粒的扩增，按试剂盒说明书提取并纯化质粒。核酸蛋白分析仪进行浓度和纯度的测定后，取10μl质粒以EcoRI和SalI双酶切(各0.5μl)，1％琼脂糖电泳进行鉴定，其余置-20°保存待用。1.2.2细菌培养和基...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国矫形外科杂志；2007年第15卷第16期...检测临床标本中极微量的病原体。 （1）淋球菌DNA的提取 ①培养菌的DNA提取 将培养得到的淋球菌，以102cfu/ml的浓度溶于碱性裂解液中裂解，裂解液组成为：1mNaCl1MNaOH和1%Sodiumdodecylsulphate。将裂解液混匀后煮沸1min，然...
参考资料医源资料库；医源图书馆；教材类；基因诊断与性传播疾病...软骨方向分化。［方法］用RTPCR法从大鼠的胚胎组织中提取TGFβ3的DNA全长，首先连接到pMDl8T载体，扩增、纯化后经测序公司测序确定插入目的基因序列的正确性，然后再用带有EcoRI、PstI内切酶的引物，从pMD18T将TGFβ3的...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国矫形外科杂志；2007年第15卷第6期...和序列的正确性，用超纯质粒纯化试剂盒QIAGENPlasmidMiniKit提取用于转染的重组质粒。1.2制备p15SiRNA用QIAGEN公司的在线设计软件设计针对p15基因mRNA的SiRNA模板，正义链为5′--TCCAGGTCATGATGATGGGCACTATAGTGAGTCGTATTA，反义链为5′-AATGCCCATCATCATGAC...
参考资料合作平台；在线期刊；中华中西医杂志；2004年第5卷第19期；论著...抗体阳性血清来源于302医院住院患者。 1.3 HEV-RNA的提取，cDNA的合成以聚合酶链反应 HEV-RNA采用异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法〔2〕，从感染戊型肝炎病毒猴胆汁中提取。套式聚合酶链反应(RT-PCR)参照文献〔2〕。第1次PCR40次循环...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...E.coliBL21感受态细菌，以获得大量的载体。应用碱裂解法提取质粒DNA，并用酚氯仿抽提纯化。 1.4重组原核表达质粒的构建 1.4.1目的基因和载体pThioHisA的酶切及回收PCR产物及载体pThioHisA分别同时用限制性核酸内切酶KpnⅠ和...
参考资料医源资料库；在线期刊；齐鲁医学杂志；2006年第21卷第1期...量使用。目前已经克隆hBD-2基因，通过基因工程技术生产提取hBD-2，对于该抗菌肽的临床应用研究及药物开发有非常广阔的前景。 本文研究采用基因工程技术，将人癌胚抗原（CEA）分泌信号肽基因片段与人防卫素2（hBD-2）抗...
参考资料资料库；在线期刊；中华现代内科学杂志；2004年第1卷第2期...子细胞提供思路。方法6周龄健康雄性Wistar大鼠、扩增、提取质粒pcDNA3.1-TGF-β1，酶切、电泳鉴定并测序。实验分组：TGF-β1基因转染BMSCs组(A组)、单纯BMSCs与软骨细胞共培养组(B组)、TGF-β1转染BMSCs后复合软骨细胞共培养组(C组)、空...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华现代外科学杂志；2010年第7卷第1期...将pBR322-HBV质粒前C区部分序列PCR产物AT亚克隆至pBS-T载体，提取和纯化质粒DNA，制作标准品并在FQ-PCR仪上得到标准曲线，进而对精确度和重复性进行统计分析。结果获得了预期希望的质粒。荧光定量PCR标准曲线的相关系数为0.995，...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2007年第7卷第6期