...(TAE)、琼脂糖凝胶、6×加样缓冲液(参见附录B)。5.3引物:扩增巴贝虫18S核糖体RNA(18SrRNA)基因和转录间隔区(ITS)基因的特异性引物(见附录C)。5.4参照材料:阳性对照为田鼠巴贝虫peabodymjr株基因组DNA。空白对照为去离...
词条词条;卫生标准;中华人民共和国卫生行业标准;化验及医学检查;人体寄生虫;血液检查;巴贝虫检测...基因 序列分析 转染 免疫印迹 摘 要 设计三条引物P1、P2、P3扩增全长hFas基因和只含有跨膜区和胞浆区的mFas基因。P2上设计一个BstXI位点,以与hFas信号肽之后的单酶切位点BstXI连接,获得带信号肽的跨膜区和胞浆区SpmFas...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...头发、甚至单一精子进行DNA定型。 4.特异性强作为引物的寡核苷酸与模板结合的正确性是决定反应产物是否特异的关键。TaqDNA聚合酶耐高温的性质使反应中引物与模板退火的步骤可以在较高的温度下进行,结合的特异性大...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸...ml,一步法抽提RNA。逆转录反应共40μl体系,包括六随机引物2μl(上海生工公司),RNA4μl,DEPC水9μl(BBI公司),5×Buffer8μl,MMLV1.5μl,Rnasin0.5μl(Promega公司),dNTP0.5μl,H2O14.5μl,37℃1h,95℃5min,最后冷却至4...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华现代外科学杂志;2007年第4卷第8期...为Promega公司产品。各种限制性内切酶、T4DNA连接酶、随机引物法DNA标记试剂盒,各种Taq酶、PCR相关试剂及RTPCR试剂盒等购自Takara及NEB公司。DNAmarker(100bpladder,1kbladder,Lamda-HindIIIfragment)购自NEB和Takara公司。蛋白酶K购自上海生...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华现代内科学杂志;2007年第4卷第1期...酶-Taq多聚酶,在体外合成特异的DNA片段,两条寡核苷酸引物结合在待扩增DNA的两侧,通过反复循环的DNA变性,引物退火和延伸,短时间内可使目的DNA得到大量扩增,这种方法可以检测癌基因的最有效方法,尤其是癌基因在结构...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;分子生物学...相色谱仪上检测SNP的具有普遍意义的色谱条件。dNTP、PCR引物峰与被检测PCR产物峰完全分离,纯合子和杂合子样本能有效区分。建立起在普通高效液相色谱仪上进行快速筛选突变型DNA的温度调控高效液相色谱法。结论 温度调控...
参考资料药品天地;专业药学;实验技术;色谱技术;色谱论文...作模板用PCR检查抗体基因在噬菌体DNA中插入片段大小,PCR引物及条件参照文献[3]。1%琼脂糖凝胶电泳检查PCR产物大小。 1.2 噬菌体抗体克隆测序模板的制备 将上述含EL5D、EL6D和Ca12噬菌体抗体克隆的15ml上清分别用PEG/NaCl沉...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...系成员相应外显子进行PCR扩增,扩增产物直接测序。用大引物法构建突变的AT表达质粒并瞬时转染COS-7细胞,用ELISA法检测细胞培养上清液和细胞内提取物中AT:Ag。结果先证者的AT:Ag和AT:A分别为179mg/L和42.3%,为Ⅰ型AT缺陷;AT基因测...
参考资料行业资讯;临床快报;遗传与基因组...凝胶电泳和A260/A280值来判定RNA的质量和浓度。 1.3 引物设计与合成 根据文献报道的人MBLcDNA序列[4],经微机分析,设计并合成2个引物。引物1系MBL信号肽N端上游一部分序列并引入了1个EcoRI酶切位点,序列为:GCGAATTCCACACC...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学