...3］病毒株细胞培养液离心沉淀后用SDS、蛋白酶K处理，酚-氯仿抽提，无水乙醇沉淀，焦炭酸二乙酯处理三蒸水溶解，-20℃保存;选取常见各亚型国际代表株B/京防B/184/93（乙型）、A/悉尼/05/97（甲3亚型）、A/深圳/1/99（甲3亚型）、A/...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2005年第5卷第3期...的抑制因子如脲、铁、肝素等有关，可通过尿标本煮沸、氯仿-酚抽提等方法予以避免。 艾滋病 目前检测HIV-抗体主要采用免疫学方法。常用的方法有EIA法（包括酶免疫法、ELISA法等）、蛋白印迹法（WB）等。 Emmons等[15...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...匀浆器内匀浆，依次加入2M醋酸纳50μ1，水饱和酚500μl，氯仿100μl，每步均需混匀，旋涡震荡器混匀10s，冰浴5～15min。（2）4℃10000g离心10min后，小心吸取上清移入1.5mlEppendorf管中，切忌吸入蛋白，加入等体积的异丙醇，-20℃放2h。...
参考资料合作平台；在线期刊；中华实用医药杂志；2005年第5卷第10期；药品检验...男性6例，女性3例。采集静脉血，蛋白酶K消化-饱和酚：氯仿(1∶1)抽提法提取200μl血清中的HBVDNA，-20℃保存备用。1.2多聚酶链反应(PCR)扩增X基因片段以甘人宝等发表的序列为依据，设计引物序列。其上游引物为：5‘-ATACACCTCCT...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...取材后立即用液氮保存。 1.2RNA抽提及鉴定采用改良酚氯仿一步法抽提总RNA。以分光光度计检测其吸光度值(A)，并行热稳定试验，于-80℃和70℃保温1h后分别电泳检测28S、18S条带变化。 1.3预杂交和探针制备将配制好的预杂...
参考资料医源资料库；在线期刊；现代泌尿外科杂志；2008年第12卷第4期...学意义。采集以上研究对象的外周静脉血液标本，采用酚氯仿法抽提DNA，置于-20℃冰箱中保存待测。1.2研究方法HLA-DQA1的PCR引物序列为：正相引物：5’-GTGCTGCAGGTGTAAACTTGTACCAGG-3’,反相引物：5’-CACGGGATCCGGTAGCAGCGGTAGAGTTG-3’。PCR试剂...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华现代中医学杂志；2006年第2卷第8期...细胞（1×106）。加入500μl细胞裂解液，65℃温浴过夜。酚/氯仿抽提两次，离心去上清液，获得细胞总DNA，加入0.1mg/mlRnaseA作用1h，将样本置于-20℃保存。取DNA提取物加入加样孔，在1.5%的琼脂糖凝胶中电泳，紫外灯下观察电泳条带...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2005年第5卷第4期...性。 3.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)：按异硫氰酸胍-酚氯仿一步抽提细胞总RNA(试剂购自Gibco公司)。以下游引物合成cDNA(试剂盒购自Gibco公司)，再以其为模板，进行PCR，若阳性表达者预期可扩增出712bp长度的片段。选用快速RT-PCR(...
参考资料合作平台；医学论文；特种医学及其他学科论文；实验医学...存放，外周血DNA提取筛查出的阳性标本采用常规酚—氯仿抽提法抽提基因组DNA(由深圳益生堂公司提供说明书)。（2）聚合酶链式反应（PCR）扩增反应PCR扩增管标号，分别加入45μLPCR反应混合物至含有扩增所需的DNA多聚酶各管...
参考资料医源资料库；在线期刊；中医儿科杂志；2009年第5卷第3期...取静脉血2～3ml，-20℃保存。1.2样本DMA制备用经典饱和酚-氯仿抽提法［2,3］。试剂购于上海Promage公司，配制在我院实验室完成。1.3引物合成由华美生物工程公司提供，其序列如下：P1：5′-CCTTCAATGGAATGGTCGAT-3′；P2:5′-CCCTTGTAAGGCAAGTC...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华中西医杂志；2006年第7卷第18期