克隆载体与表达

【摘要】目的体外克隆并表达梅毒螺旋体青霉素结合蛋白，为制备预防性疫苗奠定基础。方法利用PCR反应及基因重组技术，扩增重编码青霉素结合蛋白的基因，构建重组质粒pETJKM/TpN47，IPTG诱导表达。结果PCR法扩增出了1350bp的目...

参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2008年第8卷第5期

...CR技术扩增肾癌G250抗原的基因编码区序列，将PCR片段定向克隆至真核表达载体pcDNA3.0，并进行序列测定。结果肾癌组织RT-PCR扩增后，均产生特异性条带，位置在1000bp和1600bp之间，与预定相符。pcDNA3.0-G250分别用HindⅢ、XhoI双酶切后...

参考资料行业资讯；临床快报；肿瘤相关

...。DNA重组是完成这个任务的主要手段，其中包括大片段DNA克隆、DNA的大尺度分析、全自动DNA序列测定，基因组信息数据库的建立等新思维和新技术的不断出现和发展，再加上大规模引入其它领域先进的科学技术，原预定21世纪头1...

参考资料医源资料库；医源图书馆；教材类；生物化学与分子生物学

...传染病杂志2005Vol.23No.4P.229-23214（上海）为了构建人源单克隆抗-HBsFab片段-IFN-α表达载体，对原核表达该融合蛋白的可行性及其效果进行实验研究，研究者用聚合酶链反应(PCR)体外扩增目的基因IFN-α，单酶点插入已含人源抗-HBsFab基...

参考资料行业资讯；临床快报；遗传与基因组

趋化因子MIP-3α的克隆与表达

［摘要］目的克隆人趋化因子MIP-3α基因，表达并初步纯化MIP-3α融合蛋白。方法从扁桃体中提取总RNA，再进行RT-PCR，扩增MIP-3α成熟蛋白基因，并在5‘和3‘分别添加NcoI和EcoRI酶切位点，通过这两个酶切位点重组于pET32a（+）载体上...

参考资料医源资料库；在线期刊；局解手术学杂志；2006年第15卷第2期

...G418及PCR筛选鉴定获得分别转入了正、反义hTERT载体的抗性克隆细胞GLC-82-s和GLC-82-as。然后采用MTT法、双层软琼脂克隆形成实验、流式细胞术观察和分析了反义hTERT对肺癌细胞体外生长增殖活力的影响及是否能诱导瘤细胞的凋亡;同...

参考资料合作平台；在线期刊；中华医学实践杂志；2005年第4卷第7期；论著

...的大小与设计长度一致（图1）。2.2重组表达质粒载体的克隆与鉴定应用DNA重组技术，将PCR产物均用KpnI、HindIII双酶切，将纯化的hNaDC1A～E片段定向克隆到pGL3Basic表达载体中，构建重组表达载体pGL3hNaDC1A～E。重组质粒经KpnI、Hin...

参考资料医源资料库；在线期刊；局解手术学杂志；2007年第16卷第4期

第二节　分子克隆载体

第二节　分子克隆载体　　载体（vector）是指运载外源DNA有效进入受体细胞内的工具。载体同外源DNA在体外重组成DNA重组分子，在进入受体后形成一个复制子，即形成在细胞内能独自进行自我复制的遗传因子。因此，作为载体应...

参考资料医源资料库；医源图书馆；教材类；实用免疫细胞与核酸

...物，从人肝cDNA文库中PCR扩增核心蛋白聚糖的编码序列，克隆到原核表达载体pET42a中，转化大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTG诱导表达后，获得以高效表达的目的重组蛋白；用SDSPAGE和质谱鉴定重组蛋白。结果重组蛋白主要以包涵体形式表...

参考资料医源资料库；在线期刊；滨州医学院学报；2009年第32卷第3期

...CR选择性扩增编码成熟CD59氨基酸序列的基因片段，并将之克隆入PinPointxa—3质粒中。IPTG诱导融合蛋白表达，产物经亲和素树脂亲和层析。在体外微量反应性溶血抑制实验中检测重组CD59纯化样品的生物学活性。结果筛选得到的重...

参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学