...用二步PCR扩增,以提高检测的灵敏度,然而巢式PCR增加了引物设计的难度和实验的复杂性,而且操作技术要求高而繁琐,易导致PCR产物污染,定量分析很困难,成本较高等,因此不利于推广应用[3,7]。本实验中,应用CRT-PCR...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...始编码ATG和21bp的终止编码TGA。HCV-NS3cDNAC′从4116~5147bp。引物序列如下: NS3cDNAN′:N1.5-CGGGCACGTTGTAGGCA-TC-3′ N2.5′-AACGGACGGCTTTAGGACGA-3′ NS3cDNAC′ C1.5′-TGGGTACCTTATGGCAAGTTCCTCGCCGG-3′ C2.5′-TAGAATTCTACCAGTCCTACCTCGCCGCTG-3′...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...凝胶电泳,根据电泳条带长短判定其基因型。5-HTTLPR上游引物:5-GGCGTTGCCGCTCTGAATGC-3;下游引物:5-GAGGGACTGAGCTGGACAACCAC-3[4]。PCR反应体系:20μl体系,基因组DNA约100ng,2×GCbuffer10μl,2.5mmol/LdNTP2μl,10pmol/L上、下游引物各1μ...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华现代内科学杂志;2007年第4卷第2期...素-18(mIL-18)的cDNA核苷酸序列,设计、合成基因序列特异性引物,应用逆转录多聚酶链反应RT-PCR,以植物血凝(PHA)和细菌脂多糖(LPS)刺激的小鼠非粘附性脾细胞的mRNA为模板,扩增获得全长mIL-18,转染小鼠成纤维细胞系SVT2,并进行IL-...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...受丙肝病毒感染黑猩猩的大量血液标本中提取RNA,用随机引物反转录获得cDNA,克隆到lambda-gt-11载体上,在大肠杆菌宿主菌上进行表达,然后用非A非B肝炎患者的血清进行筛选,结果从数千个克隆噬斑中筛选到一个产生免疫反应的...
词条生物学;病毒...erseTranscriptase、Rnasin、dNTP、Oligo(dT)15均产自Promega公司。PCR引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。1.2方法1.2.1分组及处理细胞呈对数生长后,实验分组为:①空白对照组;②阳性对照组:加入顺铂浓度3.0μg/ml的细胞培...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国矫形外科杂志;2009年第17卷第11期...RT-PCR扩增均采用Promega公司试剂盒,按说明书进行操作。引物按Gerhard等[3]的设计,由GIBCO公司合成,序列为:A(outersense):5’-TCTGGAACTTCTCCTGGTCTCTCA;GCTGG-3’;B(antisense):5’-TGTAGCTGTTGˉCAAATGCTTTAAGGAAG;AAGC-3’;C(innersense):5’-GGGCCACTGTC...
参考资料资料库;在线期刊;中华现代外科学杂志;2004年第1卷第4期...受丙肝病毒感染黑猩猩的大量血液标本中提取RNA,用随机引物反转录获得cDNA,克隆到lambda-gt-11载体上,在大肠杆菌宿主菌上进行表达,然后用非A非B肝炎患者的血清进行筛选,结果从数千个克隆噬斑中筛选到一个产生免疫反应的...
词条生物学;病毒...;氯仿、异丙醇、无水乙醇购自北京化工厂(分析纯);引物由北京奥科生物技术公司合成。 1.3病毒RNA的提取 按TrizolReagent说明书进行,所用耗材先用0.1%的DEPC水处理。 1.4引物 参考RV毒株cDNA序列,计算机辅助设计...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第4期...细胞仪购自美国;多克隆活性caspase3抗体购自BD公司,引物及荧光探针由上海生工生物工程技术服务有限公司合成,Trizol试剂盒购自Invitrogen公司,RTPCR反应试剂盒购自日本TaKaRa公司,磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)抗体(sc...
参考资料医源资料库;在线期刊;齐鲁医学杂志;2010年第25卷第4期