...、温度循环参数 在PCR自动热循环中,最关键的因素是变性与退火的温度。如操作范例所示,其变性、退火、延伸的条件是:94℃60s,37℃60s,72℃120s,共25~30个循环,扩增片段500bp。在这里,每一步的时间应从反应混合液达到所...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸...TaqDNA溶酶1.5U、2.0U、2.5U、3.0U,DNA模板5.0μl循环参数94℃预变性3min后,再经94℃1min,35℃1min,72℃2min各35、40、45、50个循环后72℃延伸5min,取5μl扩增产物加上2μl上样6×buffer,经1.5%琼脂糖凝胶(内含0.5μg/mlEB染料)电泳,85~100V电...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医学研究杂志;2005年第5卷第7期...密码子之间的序列,扩增片段长2033bp.PCR反应条件:94℃预变性5min;95℃变性40s,55℃退火30s,72℃延伸130s,共20个循环;最后72℃延伸10min.凝胶电泳检测PCR结果,PCR纯化试剂盒回收目的条带。1.3嗜酸乳杆菌β半乳糖苷酶表达载...
参考资料医源资料库;在线期刊;成都医学院学报;2009年第4卷第2期...的把在体外蛋白质折叠研究中得到的规律推广到体内,用变性蛋白的复性作为新生肽段折叠的模型,并认为细胞中新合成的多肽链,不需要别的分子的帮助,不需要额外能量的补充,就应该能够自发的折叠而形成它的功能状态。...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...堡大学医学研究中心的研究人员在具有过量特发性肺纤维变性中发现了一种骨桥蛋白,可根据该蛋白将可生产多种药物靶。研究结果发表在1月15日出版的《美国呼吸道与危重症监护医学》杂志中。间质性肺病是一种慢性肺病,通...
参考资料医药经济;生物技术;生物芯片...分析的技术和依据DNA分析的技术。(15分)三、阐明核酸变性的特点及此特点为分子生物学研究提供的实验方法及可能解决的问题。(12分)四、图示多肽合成后的空间输送中信号肽的识别过程。(9分)五、什么是酶活性中心?...
参考资料医源资料库;医源习题集;生物化学...IPTG诱导表达融合蛋白,并利用Ni-NTA金属螯合亲和层析在变性条件下对表达的蛋白进行纯化,以此纯化蛋白为靶,将其包被于ELISA板上,进行3轮亲和筛选。结果电泳分析表明:表达的融合蛋白主要以包涵体的形式存在,纯化蛋白...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...度为1mg/ml。将DNA用超声打成500~800bp长度的片段,煮沸法变性,取1份DNA与9份上述混合液混合,42℃水浴3.5h。用5mmol/L磷酸钠缓冲液(pH8.5)在40℃下充分透析,浓缩DNA,再溶于200μl0.1mol/L磷酸钠缓冲液(pH8.5),再加入4mmol/L生物素-...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸...了26kD的蛋白;WesternBlot证实该蛋白为表达的单链抗体。经变性、复性后,该单链抗体可特异结合人VEGF165抗原,并与VmD11具有相同的抗原结合位点。结论成功构建和表达了抗人VEGF165单链抗体,可望进一步应用于肿瘤复发转移的诊...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...由于电流太大会大量产热,严重时,会造成胶熔化和DNA的变性。 常用的电泳缓冲液有EDTA(pH8.0)和Tris-乙酸(TEA),Tris-硼酸(TBE)或Tris-磷酸(TPE)等,浓度约为50mmol/L(pH7.5~7.8)。电泳缓冲液一般都配制成浓的贮备液,临用...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术