...构建钩端螺旋体外膜脂蛋白Lipl21基因片段的真核表达重组质粒，利用脂质体体外转染HeLa细胞，探讨其在体外真核细胞中的表达情况，为寻找新的预防钩端螺旋体病的候选疫苗分子提供实验依据。方法应用PCR技术从钩端螺旋体黄...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2006年第6卷第6期...序与表达：利用E.coli表达载体pTrxFus,构建hIL16cDNA的重组质粒，转化E.coli后，经色氨酸诱导，表达出相对分子质量（Mr)为30000的可溶性融合蛋白，表达量占菌体蛋白的30％。序列测定证实，此片段长393bp,确为hIL－16cDNA。经一步渗透...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...位点，将p53基因亚克隆连接到经相同酶切的pshuttle-cmv转移质粒上，转化DH5α筛选卡那霉素抗性菌落构建重组腺病毒转移质粒pshuttle-cmv-p53用Pmel酶切线性化采用两步法进行同源重组：先将腺病毒骨架质料pAdEasy-1转化氯化钙法制备的BJ...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华医药杂志；2006年第6卷第2期...带呈现出红色荧光，易于检测。可以检测10ng的DNA。 质粒pCMV-Myc-T10NEB标准分子量片段(1kbDNALadder)EcoR1和Xho1核酸内切酶（Takara）EcoR1和Xho1酶解缓冲液(10×Hbuffer)琼脂糖TBE或TAE缓冲液(10×)溴化乙啶染色液(10mg/ml)上样液(6×)：0.25%溴酚...
参考资料医药经济；生物技术；实验技术；生化与分子技术...，设计一对共引物及探针，建立、优化反应体系后，构建质粒标准品，利用10倍稀释法建立相对定量标准曲线，根据TCID50倍比稀释，建立灵敏度曲线。特异性检验后利用临床标本与传统的RT-PCR法进行比较。结果定量标准曲线的灵...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2008年第8卷第10期...脑胶质瘤组织获取人FGF-9全编码区cDNA，将其克隆入pCRTMⅡ质粒及pYEX4T-1真核表达质粒，经DNA自动测序仪进行DNA序列测定。将人FGF-9cDNA定向克隆入pFastBac质粒,进一步将其转座入Bacmid中，在昆虫细胞Sf9中进行表达，采用SDS-PAGE对表达产...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...核心抗原。方法设计一对特异性引物，以含HCV全长基因的质粒pBRTM/HCV1-3011为模板，扩增出HCV截短的核心抗原（1－120aa）的基因，克隆于表达载体pGEX-4T3,并转化于大肠杆菌BL21,IPTG诱导HCV截短的核心抗原的表达，表达产物经过SDS-PAGE,...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华医药杂志；2006年第6卷第11期...表位及免疫功能的研究奠定基础。方法 以含有D2VE区的质粒p30.VD2为模板，PCR扩增了编码D2VE蛋白308～468aa区段的基因片段,以pMY为表达载体，构建了表达质粒pDE1,并用酶切法使之缺失跨膜区疏水aa较多的编码序列，又构建了表达质...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...似丙型肝炎患者的血清标本采自深圳某传染病医院；Pet32a质粒及BL21大肠杆菌购自Promega公司；抗HCV-IgGELISA试剂盒购自上海科华生物技术有限公司，RNA提取试剂盒用RocheHighPureviralRNAkit，RNA扩增用TaKaRaOneStepRNAPCRKit,AMV逆转录酶、Taq酶...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2008年第8卷第4期...核杆菌H37Rv株基因中，扩增出HSP65的编码基因，从T-H8205G2质粒扩增出G2蛋白的编码基因，经相应限制性核酸内切酶消化后，插入真核表达载体pcDNA3.1/His，并将此重组质粒通过酶切、SDS-PAGE分别测定表达产物的相对分子量。结果获得...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2006年第6卷第9期