...术服务有限公司;EcoRI和XhoI内切酶、DNAMarkerDL15,000、质粒提取试剂盒和DNA胶回收试剂盒购自大连宝生物工程有限公司;200bpDNAMarker,辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG购自华美生物工程公司;兔抗钩体血清通过用灭活的钩端螺旋体黄疸...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2006年第6卷第6期...,成功地表达了重组hIL-16。hIL-16cDNA的扩增:从人PBMC中提取总RNA,poly(T)8-12反转录cDNA,以半巢式PCR扩增出特异的DNA片段。hIL-16cDNA的克隆、测序与表达:利用E.coli表达载体pTrxFus,构建hIL16cDNA的重组质粒,转化E.coli后,经色氨...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...,在细菌内进行同源重组,挑选卡那霉素抗性菌落培养并提取质粒,琼脂糖电泳挑选大片断的重组质粒pAdBJ5183-P53分别用限制性内切酶PacI和BstXI及PCR法鉴定。结果成功构建了p53基因重组腺病毒表达载体。结论采用简化的两步氯化...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医药杂志;2006年第6卷第2期...。有时还会出现三条带,其中一条是因为有一些质粒DNA在提取过程中遭到损伤而线性化,其移动速度介于螺旋状和超螺旋状质粒DNA之间,所以该条电泳带也位于上述两种带之间。如果提取的质粒很好时,这条带会很弱,有时看不...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...针均由大连宝生物公司合成。 1.2方法 1.2.1病毒RNA提取 取200μl粪便上清或病毒培养液,提取过程按HighPureViralRNAKit说明书。提取的RNA保存于-80℃,备用。 1.2.2RT-PCR检测EV71和CA16 以病毒RNA为模板,用随机引物,经...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第10期...重新划板进行鉴定。然后取阳性的白色菌落培养,裂解,提取重组Bacmid。0.5%琼脂糖凝胶电泳,23V12h。 1.6 人FGF-9的表达 在含有10%FCS的TC-100培养液中培养Sf9细胞。将生长状态良好的细胞移至24孔板,每孔细胞数约为2.3×105个细...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...接酶与pGEM-T载体连接,转化感受态JM109,筛选出阳性克隆,提取质粒后,经BamHI/EcoRI双酶切反应,回收酶切产物,经T4DNA连接酶与经同样双酶切的pGEX-4T3连接,转化感受态DH5α,提取质粒后,经BamHI/EcoRI双酶切鉴定,筛选出含目的基...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医药杂志;2006年第6卷第11期...水1~4型;D2V单抗;酶标羊抗鼠IgG;本室制备。 5.质粒提取、酶切、连接、转化、蛋白电泳和免疫转印:皆参考《分子克隆实验指南》〔11〕进行。 6.引物:参考Menbl分析的D2VE区氨基酸序列〔12〕设计了一对引物,本院放射医...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...因的重组表达载体。方法设计合成HCVCore基因全长引物,提取丙型肝炎患者血清中的HCVRNA,应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)扩增C区基因片段,用限制性内切酶BamH1和SaL1双酶切后,连接到Pet32a表达载体中,并转化到BL21大肠杆菌...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第4期...汉菊教授赠送。 1.2方法 1.2.1结核杆菌基因组DNA的提取见文献[2]。 1.2.2HSP65基因和G2扩增根据结核杆菌H37Rv株HSP65基因的全序列设计上游引物p1:5′CGCGGTACCAAGCTTATGGC-CAAGACAATTGCGT3′,包含KpnⅠ,HindⅢ切点,下游引物5′CCGGG...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2006年第6卷第9期