...分子生物学检测方法 1.1常规 PCR技术是一种特异性扩增DNA的体外酶促反应,用于扩增位于两段已知序列之间的DNA,利用特异DNA序列鉴定细菌的方法，因其操作安全、简便快速、灵敏度高、特异性强等优点受到广泛重视。李小...
参考资料医源资料库；在线期刊；成都医学院学报；2010年第5卷第2期...。1.3.3实时定量PCR采用SYBRGreenI荧光染料法进行实时定量PCR扩增的检测。PCR反应体系为20μl，其中2×SYBRpremixEXTaqTM10μl（TaKaRaDRR041A）、上下游引物各0.4μl（10μmol/L）、cDNA2μl、dH2O7.2μl。于实时定量PCR仪（美国MJOPTICON-2）...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华中西医杂志；2009年第10卷第2期...任沈佐君博士介绍，乙肝基因检测全称为“体外基因检测扩增技术”，目前在我国运用最多的是其中的“荧光定量PCR技术”。这种技术是通过特定仪器，将被检测者体内基因片段样品中的微量病毒因子成倍扩增，荧光探针发出的...
健康求医问药；疾病专题；肝病专题；乙肝；乙肝常识...pmol/L上、下游引物各1μl，灭菌双蒸水13.3μl。于PT-200PCR扩增仪进行如下循环：先94℃预变性4min；然后94℃30s，58℃30s，72℃30s，30个循环；最后72℃延伸10min。PCR产物经1.5％琼脂糖电泳，凝胶回收试剂盒回收PCR电泳产物，与线性化...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2008年第8卷第10期...缺少合适的内参质控排除假阳性或假阴性结果；3、核酸扩增聚合酶（Taq）大多是细菌来源，带有痕量的细菌核酸成分。近期，中国科学院苏州生物医学工程技术研究所血液免疫学研究中心提出一种双重荧光定量PCR方法可提高细...
参考资料医药经济；生物技术；技术要闻...病人及对照组外周血标本中提取RNA，进行反转录反应后PCR扩增并回收纯化产物，制备感受态细胞并进行目的片段的TA克隆，提取质粒并鉴定重组质粒后制作标准曲线。制备MUC1引物，序列为:5′(FAM)CAGTGTGTGGAAGCTCATGTGGGCC3&prim...
参考资料医源资料库；在线期刊；齐鲁医学杂志；2010年第25卷第1期...管中。各反应管于Roche荧光定量检测仪（Lightcycler）进行扩增:42℃25min,93℃预变性2min,93℃5s,60℃10s,72℃10s,共45个循环。根据HCVRNA标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本中HCVRNA的准确含量。同时分析标准品建立的标准曲...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2007年第7卷第8期...），BDFACSCalibur流式细胞仪（美国BD公司），ABI7000RaelTimePCR扩增仪（美国ABI公司）。 1.3细胞培养及细胞总RNA提取 细胞培养液为含10%灭活新生牛血清的DMEM培养基，HepG2.2.15细胞培养液另加G418，常规培养肝癌细胞株HepG2，HepG2-X...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2008年第8卷第2期【摘要】目的采用PCR体外扩增法定量检测乙型肝炎病毒DNA的载量，为乙型肝炎的治疗提供参考。方法采用PCR体外扩增法定量检测乙型肝炎病毒DNA的载量，检测不同病程状态下的乙肝患者76例，血清标本196份。其中HBeAg阳性的患者30...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华现代内科学杂志；2006年第3卷第5期...的准确性和可重复性。二、适用范围：医疗机构临床基因扩增检验实验室按照《关于医院开展人感染H7N9禽流感病毒核酸检测有关工作的通知》（卫办医政函〔2013〕383号）和《关于做好医疗机构人感染H7N9禽流感检测试剂供给保障...
词条法规文件；传染病