...A抗凝,样品在抽血后1h内分离白细胞,贮-20℃备用。 1.2引物 上游为5′-TTCACAAAGCGCCTTCCCCC-3′,下游为5′-GGCCTAGGTTGAGGTTGACC-3′,由中国科学院上海细胞生物研究所合成。 1.3试剂 淋巴细胞分离液(上海细胞生物研究所提供...
参考资料合作平台;在线期刊;中华实用医药杂志;2004年第4卷第20期;检验与临床...分别以正常角膜和碱烧伤角膜的cDNA为模板,应用2种锚定引物和12种随机引物,进行24种不同引物组合的差异显示反转录聚合酶链反应(DDRT-PCR),对目的基因进行克隆、克隆鉴定、测序及同源性分析。结果在相同PCR反应条件下,同...
参考资料行业资讯;临床快报;遗传与基因组...胞培养液,经PEG浓缩后采用异硫氰酸胍法提取基因组RNA。引物设计时参照腮腺炎病毒SBL-1株及RW株的cDNA序列〔1-3〕:引物H1、H2、H3、H4用于扩增血凝素-神经氨酸酶(HN)基因变异区的220个核苷酸片段〔4〕,引物F1、F2、F3、F4用于扩增...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...自HyˉClone公司;其它试剂均为国产分析纯。 1.2方法1.2.1引物设计与合成根据人bFGFcDNA基因序列,设计合成一对引物,引物中加入HindIII酶切位点:5′AAGCTTATGGCAGCCGGGAGCATC3′;5′AAGCTTTCAGCTCTTAGCAGACATTGGAAG3′。1.2.2反转录聚合酶链式反应...
参考资料合作平台;在线期刊;中华中西医杂志;2004年第5卷第13期;论著...由美国疾病控制和预防中心(CDC)Dr.OlenKew提供。 3 引物 UG1:5′-TTTGTGTCAGCGTGTAATGA- 3′;UC1:5′-GAATTCCATGTCAAATCTAGA-3′。 UG1为上游引物,对应于SabinⅠ序列的第2402~2421位核苷,UC1为下游引物,对应于SabinⅠ序列...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...隆;核苷酸序列分析 摘 要 使用一对IgVH通用引物,应用RT-PCR技术,从分泌抗人C1qMcAb的B6杂交瘤细胞株总RNA扩增出一387bp的DNA片段。通过计算机网络系统对其进行序列的类似性检索,未发现与之一致或显著相似(同源)...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...止子和CP4-EPSPS抗草甘膦基因等外源基因,自行设计了两对引物,采用双重PCR同时扩增上述基因,用8g/L羟丙基甲基纤维素为筛分介质,在50cm×100μmi.d.涂壁毛细管中,于一10kV电压下用激光诱导荧光-毛细管电泳检测转基因大豆...
参考资料药品天地;专业药学;中药大全;中药指纹图谱...。采用BHK细胞空斑实验方法进行病毒滴定,利用NS3区特异引物进行逆转录-多聚酶链反应以获NS3区基因片段,应用ABI-PRSMTM310测序系统进行序列分析。结果 在早期(感染后24~36h)细胞培养液中病毒量为106PFU/ml,在后期(感染后3...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...FRS)病人的外周血淋巴细胞(PBL)提取RNA, 以Oligod(T)15为引物合成cDNA第一链,以自行设计的数对人抗体V区通用引物扩增出了人抗体VH、Vκ、Vλ基因,以自行设计的linker引物扩增了linker,并通过SOE反应(splicingbyoverlapextension)构建...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...般含有poly(a)尾,因此现有的方法基本上都是利用共同引物将不同的mRNA反转录成cDNA,以cDNA为对象研究基因表达的差异。1992年Liang等[2]建立了一种差异显示反转录pCR法(differentialdisplayreversetranscriptionPCR,dDRT-PCR),为检测成...
参考资料合作平台;医学论文;基础医学论文;遗传学