...一折叠机理，对于保留蛋白质活性，维持蛋白质稳定性和包涵体蛋白质折叠复性都具有重要的意义，因此蛋白折叠问题被列为“21世纪的生物物理学”的重要课题。多年来研究人员们一直致力探索多种途径了解它们的折叠（或去...
参考资料行业资讯；临床快报；细胞分子与蛋白质组...强表达操纵子调控的高效原核表达导致了抗体蛋白大量以包涵体形式存在面临复性的难题。本研究尝试采用构建噬菌体单链抗体的方式探索以噬菌体为载体在原核系统中活性表达，制备单链基因工程抗体的可能。 我们的结果...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...蓝染色，选取表达量最高的作为蛋白纯化的工程菌。制备包涵体，选用Ni-superflow进行重组蛋白的纯化，具体步骤按说明书进行。收集各部分洗脱峰，SDS-PAGE鉴定。凝胶过滤脱盐复性重组蛋白。1.4小鼠免疫方案进行将6周龄Balb/c小鼠...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华医学研究杂志；2007年第7卷第11期...1 VEGF及其抗体的纯度与活性 VEGF在本原核表达体系中以包涵体的形式存在,经变性、制备电泳及复性可获得一纯度较高的43kD重组蛋白即人重组VEGF（图1），复性后的蛋白经HPLC的反相层析(Cosmosi14,6×150mm,Fo9033,5C18-P-300)表现为单一...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...对其分子折叠、构象形成和生物学活性有帮助。而产物为包涵体形式的原核表达系统虽表达效率更高，但产物生物学活性差、生性复性过程困难等弊端仍限制其应用。 本研究中我们利用PCR技术，选择性扩增编码成熟CD59分子...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...浴下搅拌，超声裂解细胞，将沉淀溶于尿素缓冲液中洗涤包涵体〔4〕。 1.4 抗原的纯化和测定 将初步提取的HBeAg置预先用50mmol/LtrisHCl(pH7.5)缓冲液平衡的DEAE-SepharoseFastFlow层折拄，用含NaCl的上述缓冲液不连续梯度洗脱，流速...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...NA的高表达。 重组IL－16在pET等原核表达系统中，都以包涵体的形式存在，呈不可溶性表达，复性中由于蛋白的不正确折叠，而使IL－16的生物学活性受到影响。而本实验所选用的Invitrogen公司的高效、可溶性表达系统—Thio-Fusio...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...mol/LIPTG室温诱导，表达3h后收集菌体，超声破碎细胞收集包涵体，用含3mol/L尿素、50mmol/LTris-HCl、pH7.0的溶液洗涤后加入6mol/L盐酸胍、0.1mol/LTris-HCl、pH7.0溶液溶解，经固相金属离子亲和层析(IMAC)一步纯化〔5〕。用TEA缓冲液（0.4mol/LL...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...法克隆了pCPB（CPB的前体）的cDNA序列，并在大肠杆菌中以包涵体形式获得高效表达，表达产物pCPB经变性、复性后、胰蛋白酶酶切激活为活性羧肽酶B，用阴离子交换柱层析DEAE-FF浓缩纯化和分子筛层析进一步分离纯化得到活性重组...
参考资料医药经济；生物技术；技术要闻...ＲＬＧ，并实现了在大肠杆菌中的高效表达，表达产物以包涵体形式存在，经变性、复性、脱盐、凝胶层析纯化处理，重组猪ＩＦＮ—γ具有较高的干扰素活性。同时，万建青、陈涛等分别成功地在毕赤酵母表达系和大肠杆菌表...
参考资料药品天地；专业药学；药学研究