1907年,捷克学者Halberstaeder和Prowazek发现沙眼包涵体,1956年我国学者汤飞凡等分离沙眼衣原体成功,引起了全世界对其进行广泛深入的研究[1]。沙眼衣原体(chlamydiatrachomatis,Ct)与人类疾病关系密切,且目前已成为许多国家和地...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...蛋白。E.coli表达单链抗体主要有两种方式:①表达产物以包涵体形式存在于菌体内,这种方法简单,不需要信号肽,但产生的蛋白常常没有活性,经过体外溶解、复性、重新折叠、色谱纯化等许多步骤,才可能获得有活性的单链...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;肿瘤学...析。16融合蛋白的纯化将诱导表达的菌体超声破碎后,包涵体经洗涤,8mol/L尿素溶解,稀释复性,加50%预处理的亲和层析介质GlutathioneSepharose4B,按试剂盒说明书进行纯化。17Western-blot分析纯化的嵌合抗原,经SDS-PAGE电泳后,...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医药杂志;2006年第6卷第11期...迹反应[4]。 1.4 重组LT活性测定 按文献方法分离包涵体[4]。收集42℃诱导5h的细菌100ml,离心后每克湿菌加3mlTEBuffer悬浮,超声粉碎、变性、复性后浓缩至1ml,过滤除菌、备用。MTT比色法测定LT对培养的L929细胞的细胞毒...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...mol/LIPTG诱导,室温振摇3h后收集菌体,超声裂解细胞收集包涵体,用含3mol/L尿素、50mmol/LTris-HCl、pH7.0的溶液洗涤后加入6mol/L盐酸胍、0.1mol/LTris-HCl、pH7.0溶液溶解,经IMAC柱一步纯化[5]。用TEA缓冲液(0.4ml精氨酸-HCl,0.1mol/LTris-HCl,2m...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...特性的研究。方法 用pBV220载体进行抗原的非融合表达,包涵体经变性凝胶过滤层析及离子交换层析纯化后透析复性,以Westernblot、ELISA、动物免疫与抗原捕获RT-nPCR等方法研究其免疫学特性。结果 获得了ORF2.3的高效表达,表达...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...重组毒素IL-2-PE40‘初纯品的制备 超声破菌后,离心收集包涵体,按文献[6]进行变性、复性,在最后得到的上清中加入复性液,对0.01mmol/L的PBS透析48h,期间共换液6次。于透析前、中、后分别取样,加到培养的HL60细胞中,共同孵育6...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...因已被克隆并在大肠杆菌中表达,但产生的都是无活性的包涵体,需要蛋白质复性才能获得有活性的酶[2-4]。我们利用融合蛋白技术构建了一套大肠杆菌的表达系统,能够高效的表达可溶性的肝素酶I,并同过亲和分离简化了肝素...
参考资料医药经济;生物技术;环保技术...1 VEGF及其抗体的纯度与活性 VEGF在本原核表达体系中以包涵体的形式存在,经变性、制备电泳及复性可获得一纯度较高的43kD重组蛋白即人重组VEGF(图1),复性后的蛋白经HPLC的反相层析(Cosmosi14,6×150mm,Fo9033,5C18-P-300)表现为单一...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...新生儿在通过受CT感染的母亲产道时,可受染引起新生儿包涵体性结膜炎和肺炎,前者多于生后5天~14天出现眼睑和结合膜肿块及粘液性分泌物,结膜充血,经数月后逐渐自愈,一般不留后遗症;新生儿肺炎一般发生在生后1天~...
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