...:①PCR扩增靶DNA;②将特异的PCR扩增产物变性,而后快速复性,使之成为具有一定空间结构的单链DNA分子;③将适量的单链DNA进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳;④最后通过放射性自显影、银染或溴化乙锭显色分析结果.若发现单链DNA...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...词:人绒毛膜促性腺激素β亚基;序列分析;基因表达;复性 摘 要 目的:以该室克隆的PCRⅡ/hCGβ载体为模板,亚克隆到表达载体PG5中使hCGβ基因在大肠杆菌中进行高效表达。方法:改变部分hCGβ序列,得到重组PG5/hCGβ载体...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...点是共显性,可以区别纯合和杂合基因型,而且稳定、重复性强,目前在某些生物体中开发的RFLP的探针已经遍及整个基因组。但是RFLP存在较多缺点,如对DNA需要量较大,过程较为复杂,所需的放射性探针对人体危害较大。而分...
参考资料合作平台;医学论文;中西医结合论文;中医中药...增反应程序为:92℃预变性5min,35个循环的92℃变性1min、35℃复性1min、72℃延伸2min。最后,72℃延伸10min,终止反应。 1.4.3琼脂糖凝胶电泳取上述PCR产物8μl点样于1.4%琼脂糖凝胶上,于0.5×TBE缓冲液中5V/cm电泳。EB染色在Bio-Rad凝胶成像...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医药杂志;2006年第6卷第3期...的重组嗜酸乳杆菌LacZ却失去了β半乳糖苷酶活性,即使复性也不能恢复。结论克隆表达的成功为该酶的酶学性质研究和可能的应用打下了基础。【关键词】嗜酸乳杆菌;β半乳糖苷酶;克隆表达;HisTag;复性FunctionalExpressio...
参考资料医源资料库;在线期刊;成都医学院学报;2009年第4卷第2期...作标准品并在FQ-PCR仪上得到标准曲线,进而对精确度和重复性进行统计分析。结果获得了预期希望的质粒。荧光定量PCR标准曲线的相关系数为0.995,线性范围5×103copies/μl~5×109copies/μl。批内、批间变异系数值均小于5%,精确度高...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2007年第7卷第6期...用耐热连接酶做LCR只用两个温度循环,94℃min变性和65℃复性并连接,循环30次左右。其产物的检测也较方便灵敏。目前该方法主要用点突变的研究与检测、微生物病原体的检测及定向诱变等,还可用于单碱基遗传病多态性及单碱...
词条通用术语;微生物检测术语;输血医学;人类白细胞抗原;分型技术...用耐热连接酶做LCR只用两个温度循环,94℃min变性和65℃复性并连接,循环30次左右。其产物的检测也较方便灵敏。目前该方法主要用点突变的研究与检测、微生物病原体的检测及定向诱变等,还可用于单碱基遗传病多态性及单碱...
词条输血医学;人类白细胞抗原;分型技术...用耐热连接酶做LCR只用两个温度循环,94℃min变性和65℃复性并连接,循环30次左右。其产物的检测也较方便灵敏。目前该方法主要用点突变的研究与检测、微生物病原体的检测及定向诱变等,还可用于单碱基遗传病多态性及单碱...
词条通用术语;微生物检测术语;输血医学;人类白细胞抗原;分型技术...Tm值,则有效引物的Tm为55~80℃,其Tm值最好接近72℃以使复性条件最佳。5.碱基础随机分布引物中四种碱基的分布最好是随机的,不要有聚嘌呤或聚嘧啶的存在。尤其3′端不应超过3个连续的G或C,因这样会使引物在G+C富集序列区...
词条手术