...埋法切割DNA。 四、DNA 待切割的DNA应当已去除酚、氯仿、乙醇、EDTA、去污剂或过多盐离子的污染,以免干扰酶的活性。DNA的甲基化也应该是酶切要考虑到的因素。关于甲基化的内容,参见第252页至253页之甲基化相关内容...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...为本所养蚊室常规饲养。112主要化学试剂无水乙醇,氯仿,异戊醇,醋酸钠,均为国产分析纯。蛋白酶K,饱和酚,琼脂糖,Maeker,PCR试剂盒,均购自Sangon公司,尼纶膜为Amersham公司产品,酯酶B1、A2引物由博亚公司合成,酯酶B...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2005年第5卷第2期...清。e:如标本溶血严重经上述裂解处理后,再加等体积酚-氯仿抽提、冷乙醇沉淀DNA,加10μlDW溶解待检。 2、PCR扩增 (1)引物设计。以HSVDNA聚合酶的高保守区为检测靶序列以确保特异性。设计3个引物,一个上游共同性引...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;基因诊断与性传播疾病...限制性内切酶(如EcoRⅠ,HindⅢ等)酶切1小时。 (8)酚/氯仿抽提DNA,乙醇沉淀以去除dNTP或加0.5mol/LEDTA(pH8.0)至终浓度10mmol/L。 (9)用电泳方法分离放射性标记的探针。 2.从RNA合成单链cDNA探针cDNA单链探针主要用来分离cDNA文...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...akara大连公司合成)。1.4实验步骤1.4.1血清HBVDNA抽提采用酚-氯仿法提取血清HBVDNA。1.4.2PCR扩增PCR扩增目的基因片段采用94℃预变性5min;94℃45s,62℃30s,72℃30s,共35个循环,最后72℃延伸10min。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定(图1)。...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华实用医药杂志;2006年第6卷第16期...);盐酸环丙沙星(购自贵州科伦药业有限公司);酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)(购自BioFlux公司);普通营养琼脂培养基(购自杭州天和微生物试剂有限公司)。质粒提取液:溶液Ⅰ:含50mmol/L的葡萄糖,25mmol/LTris·C1(pH8....
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医学实践杂志;2008年第7卷第2期...提取难度大。目前提取cfDNA最常用的方法主要有传统的酚-氯仿-异戊醇法,磁珠法、硅胶膜吸附柱法)。有研究结果表明,应用酚-氯仿-异戊醇抽提配合微量DNA助沉剂法可获得较高的cfDNA含量,且提取的cfDNA能有效地为qPCR提供模板...
参考资料医药经济;生物技术;技术要闻...化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白,再用有机溶剂酚与氯仿抽提掉蛋白质和其它细胞组份,用乙醇或异丙醇沉淀核酸。提取的核酸即可作为模板用于PCR反应。一般临床检测标本,可采用快速简便的方法溶解细胞,裂解病原体,...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;细胞学技术...,熔点256~257℃;不溶于水,能溶于乙醇,稍溶于乙醚、氯仿、苯。 常用的何首乌及其制剂含量测定方法有:薄层色谱法、高效液相色谱法、紫外-可见分光光度法、高效毛细管电泳法、荧光分光光度法、酶化学发光法和流...
参考资料药品天地;专业药学;实验技术;色谱技术;色谱论文...胺酶测定盒(购自杭州天和微生物试剂有限公司),酚-氯仿-异戊醇(25:24:1)(购自BioFlux公司),普通营养琼脂培养基(购自杭州天和微生物试剂有限公司)。质粒提取液(按文献[2]配制)溶液Ⅰ:含50mmol/L的葡萄糖,25mmol/L...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医学实践杂志;2007年第6卷第8期