【摘要】目的构建带TAP标签流感病毒8质粒反向遗传包装系统，以期应用于流感病毒感染宿主细胞的蛋白分子机理的研究。方法两步RT-PCR方法扩增流感病毒8基因，人工合成TAP基因序列，并采用3次PCR的方法融合TAP基因和NP基因。将...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2008年第8卷第6期...，用鸟枪法在枯草杆菌BD224菌株原生质体中克隆抗性重组质粒，提取重组质粒后再次转化敏感菌株以证实克隆片段的抗性功能。结果 对ANC强抗性突变株DM104对化学特性不相关的化合物如溴化乙锭和诺丹明产生交叉抗性。钙通道...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...入DH5α大肠杆菌，SDS碱裂解法小量提取大肠杆菌阳性构建质粒DNA，设计合适引物对HBVC区基因进行PCR扩增，对PCR条件中的退火温度、Mg2+浓度进行了优化，并比较三种不同TaqDNA聚合酶的灵敏度。结果转化的大肠杆菌质粒DNA最佳退火...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2007年第7卷第8期...论和技术上的积累。 1 材料与方法 1.1 菌株与质粒 枯草杆菌Ki-2-132株，来自中国科学院遗传所。携带A蛋白基因的质粒pRIT-5及大肠杆菌JM107由中科院生物物理所赠送。 1.2 质粒DNA提取［9］ 基本上按AandrewMountain等...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学【摘要】目的探讨提纯质粒DNA的方法并进行检测。方法首先采用条件不相同的碱裂解法获含质粒DNA的上清，然后分别以传统的酚-氯仿抽提法（A）、异丙醇沉淀法（B）、QIAprepSpinMiniprep试剂盒（C）和QIAGENplasmidMidi试剂盒（D）提纯...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华医药杂志；2007年第7卷第3期...pGEM-Teasy载体上并转化至JM109感受态菌中构建成pGEM-Teasy-mSLC质粒。先用限制性内切酶NheI/EcoRV双酶切质粒pCI/GPI-Fc-Sig和pGEM-Teasy-mSLC，构建pCI/GPI-Fc-mSLC中间质粒，再用NheI/NotI双酶切质粒pCI/GPI-Fc-mSLC和pcDNA3.1，构建成pcDNA3.1-mSLC-GPI-Fc真核...
参考资料合作平台；在线期刊；中华医学实践杂志；2004年第3卷第11期；论著...S-7细胞中的瞬时表达。方法体外扩增并酶切鉴定pcDNA3-CD200质粒；常规方法培养COS-7细胞；用电转染基因法将pcDNA3-CD200质粒转入COS-7细胞中，用流式细胞术（FCM）检测转染细胞CD200表达。结果转染COS-7细胞后72h，CD200基因表达阳性的...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华医学研究杂志；2006年第6卷第12期【摘要】1.0×104拷贝/μl的高中浓度的质粒标准品可以耐受21次以内反复冻融，低于1.0×104拷贝/μl的质粒标准品反复冻融后量值变化较大，临床使用的试剂盒所配的低浓度标准品应避免反复冻融。【关键词】实时定量PCR;质粒DNA标准...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华中西医杂志；2009年第10卷第10期...，构建成pcDNA/b。应用脂质体介导的基因转移技术将重组质粒体外转染至人脐带静脉内皮细胞（HUVEC）。结果重组质粒转染能明显促进内皮细胞的分裂增殖。进一步将重组质粒通过脂质体介导，体外转染至人肾细胞293细胞系进行表...
参考资料合作平台；在线期刊；中华中西医杂志；2004年第5卷第13期；论著...真核表达载体pcDNA3的Pcmv启动子下游，构建重组真核表达质粒pcDNA3-E，用脂质体转染法转染NIH3T3细胞，表达产物以免疫荧光、SDS-PAGE和蛋白质印迹进行分析检测。结果 成功构建了重组真核表达质粒pcDNA3-E，通过脂质体转染法导入NI...
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