...前用于测序的技术主要有Sanger等(1977)发明的双脱氧链末端终止法和Maxam和Gilbert(1977)发明的化学降解法。这二种方法在原理上差异很大,但都是根据核苷酸在某一固定的点开始,随机在某一个特定的碱基处终止,产生A,T,C...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...A片段与载体DNA在试管内连接的过程。常用的方法:1.粘性末端连接法;2.平末端连接法;3.结尾法;4.人工接头法(linker)。15.限制性核酸内切酶(restrictionendonuclease,内切酶):是一类特异性地水解双链(ds)的DNA的磷酸二酯酶。...
参考资料医源资料库;医源习题集;分子生物学...化DH5α和JM109菌株。PCR和酶切法鉴定阳性克隆,双脱氧链末端终止法测定核苷酸序列并进行同源性分析。结果发现核苷酸变异呈散在分布,三株间核苷酸和氨基酸序列同源性分别为93.3%~94%及97%~99.2%,与已报道的中国株(CN)相比,...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...学研究中一直发挥着重要作用。以Sanger法(双脱氧核苷酸末端终止法)为代表的第一代测序技术帮助人们完成了从噬菌体基因组到人类基因组图谱等大量测序工作,但由于其存在成本高、速度慢、通量低等不足,并不是后基因组...
参考资料行业资讯;临床快报;遗传与基因组...利用NheⅠ等内切酶,对重组体进行RFLP分析。采用双脱氧末端终止法测定克隆点交界区DNA序列,证实重组片段的正确性。 重组病毒的构建:将经测序确定的重组体分别与SIVmac142-5′半病毒克隆(P142-5′)经SphⅠ切点连接,形成完...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...GGT],常规PCR扩增,电泳鉴定并回收纯化扩增产物,以粘末端方式将扩增单克隆抗体重链可变区基因克隆到puc18/puc19,双脱氧末端终止法[2],对插入重链可变区基因测序分析。 2 结果与讨论 测序结果表明单克隆抗体...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学... 1端粒、端粒酶与细胞永生 端粒是真核细胞染色体末端的特殊DNA-蛋白质结构,其DNA的特殊是含有大量的(TTAGGG)n串联重复并富含G的重复序列,这些序列在进化中高度保守。端粒结构功能主要有2个:一是可保护染色体基因...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;肿瘤学...0~15cm,再注入溶有利凡诺100mg生理盐水100mL,紧缚导尿管末端,裹以无菌纱布,置于阴道内24h取出,注药后12h口服米索前列醇600μg。所有病人均于妊娠物排除后即清宫以观察胎儿胎盘残留情况,必要时术中宫颈注射10U缩宫素。1...
参考资料医源资料库;在线期刊;齐鲁医学杂志;2007年第22卷第3期...1.6 DNA序列分析 采用PE310型DNA自动测序仪,进行双脱氧末端终止法自动荧光测序,以DNASIS软件进行核苷酸和氨基酸序列比较分析。2 结果与讨论2.1 人胎肝总RNA提取 提取制备的总RNA较纯,A260/A280值为1.9;经1.5%甲醛变性琼...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...型随机分为永久性缺血组和缺血再灌注组,各30只。原位末端标记法检测两组脑组织细胞凋亡的情况,免疫组织化学方法检测脑组织TIMP-1表达的情况。结果脑缺血后脑组织细胞凋亡数逐渐增多,缺血12h达高峰,以后逐渐减少(F=14.4...
参考资料医源资料库;在线期刊;齐鲁医学杂志;2010年第25卷第6期