...co/8/34/MountSinai(H1N1)MDCK细胞培养上清液，用Roche公司病毒RNA提取试剂盒提取病毒RNA。用Universal引物进行cDNA合成，具体方法参见TAKARA公司MMV逆转录酶说明书。分别取5μlcDNA作模板，用TAKARA公司PrimeSTARTAQ酶进行流感病毒8基因PCR扩增，...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2008年第8卷第6期...枪法在枯草杆菌BD224菌株原生质体中克隆抗性重组质粒，提取重组质粒后再次转化敏感菌株以证实克隆片段的抗性功能。结果 对ANC强抗性突变株DM104对化学特性不相关的化合物如溴化乙锭和诺丹明产生交叉抗性。钙通道阻断剂...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...件。方法将HBV基因组导入DH5α大肠杆菌，SDS碱裂解法小量提取大肠杆菌阳性构建质粒DNA，设计合适引物对HBVC区基因进行PCR扩增，对PCR条件中的退火温度、Mg2+浓度进行了优化，并比较三种不同TaqDNA聚合酶的灵敏度。结果转化的大...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2007年第7卷第8期...大肠杆菌JM107由中科院生物物理所赠送。 1.2 质粒DNA提取［9］ 基本上按AandrewMountain等的方法提取。 1.3 转化方法 pRIT-5通过细菌感受态转化至枯草杆菌R25菌株中［10］，在10μg/ml氯霉素的平皿上选择转化体，再通过原...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...EP管中，后面的步骤同方法A。1.2.1.3方法CQIAprepSpinMiniprepKit提取方法：依次加入试剂盒内的溶液P1、P2、N3，室温13000rpm离心10min，吸上清至QIAprepSpin柱内，离心30s，用0.75ml溶液PE洗QIAprep柱，弃穿流液，再离心30s，去掉残留的乙醇，将...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华医药杂志；2007年第7卷第3期...、T4DNA连接酶、TaqDNA聚合酶、dNTP购自Promega公司。TrizolRNA提取试剂盒、SuperScriptIII逆转录试剂盒购自Invitrogen公司。质粒抽提试剂盒、胶回收试剂盒为北京博大生物公司产品。限定性内切酶均购自美国BioLabs公司。引物由北京三博生...
参考资料合作平台；在线期刊；中华医学实践杂志；2004年第3卷第11期；论著...；FITC标记的鼠抗人CD200单克隆抗体购自SantaCruz公司；质粒提取试剂盒、限制性内切酶EcoRⅠ和HindⅢ、DL2000Marker和λDNAHindⅢdigestMarker均购自大连Takara公司，化学试剂均为国产分析纯。仪器：CO2培养箱系日本平泽公司生产；MT-2型倒置...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华医学研究杂志；2006年第6卷第12期...实验室自配试剂有：LB液体培养基(称取胰蛋白胨10g、酵母提取液5g、NaCl10g，加水800～900ml搅拌至溶解。用5MNaOH调pH=7.4，定容至1L，混匀，高压灭菌，冷却后加入80mg/ml的Amp1ml);SOC液体培养基(称取胰蛋白胨6g，酵母提取液1.5g、NaCl0.15g...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华中西医杂志；2009年第10卷第10期...AAG3′。1.2.2反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）用TRIzol试剂盒提取扁桃体组织总RNA，经AMV逆转录酶进行RT-PCR合成cDNA。扩增参数为:50℃，30min;94℃，30s;68℃，3min，40个循环;72℃延伸8min。1.2.3克隆载体的构建使用新鲜PCR产物与pCR-TOPO载体...
参考资料合作平台；在线期刊；中华中西医杂志；2004年第5卷第13期；论著...+～++++时收获3ml病毒培养上清，用异硫氰酸胍沉淀法〔5〕提取其核酸作为逆转录模板，逆转录反应应用Promega公司的逆转录试剂盒(方法详见说明书)。PCR反应条件为94℃30s,55℃40s,72℃90s,25个循环后，72℃延伸10min。 重组表达质粒...
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