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  • HCV核心区基因的截短及其表达

    ...析。16融合蛋白的纯化将诱导表达的菌体超声破碎后，包涵体经洗涤，8mol/L尿素溶解，稀释复性，加50％预处理的亲和层析介质GlutathioneSepharose4B,按试剂盒说明书进行纯化。17Western-blot分析纯化的嵌合抗原，经SDS-PAGE电泳后，...

    参考资料医源资料库；在线期刊；中华医药杂志；2006年第6卷第11期
  • 人淋巴毒素cDNA在大肠杆菌表达的研究①

    ...迹反应［4］。　　1.4　重组LT活性测定　按文献方法分离包涵体［4］。收集42℃诱导5h的细菌100ml，离心后每克湿菌加3mlTEBuffer悬浮，超声粉碎、变性、复性后浓缩至1ml，过滤除菌、备用。MTT比色法测定LT对培养的L929细胞的细胞毒...

    参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学
  • 抗人纤维蛋白单链抗体-链亲和素融合蛋白的稳定性及对动物纤维蛋白的识别

    ...mol/LIPTG诱导，室温振摇3h后收集菌体，超声裂解细胞收集包涵体,用含3mol/L尿素、50mmol/LTris-HCl、pH7.0的溶液洗涤后加入6mol/L盐酸胍、0.1mol/LTris-HCl、pH7.0溶液溶解，经IMAC柱一步纯化［5］。用TEA缓冲液（0.4ml精氨酸-HCl，0.1mol/LTris-HCl,2m...

    参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学
  • 中国医科院医药生技所新药筛选研究取得硕果——建立三种新药筛选平台并确定相关产物结构

    ...全一致。进一步研究结果表明,所表达的重组EGFR-TK主要以包涵体的形式存在。研究人员对包涵体重组蛋白进行复性，并采用组氨酸亲和层析柱纯化，同时对蛋白进行酶学性质的研究，终于构建成功酪氨酸激酶抑制剂的高通量筛选...

    参考资料医学教育；科教新闻
  • 戊型肝炎病毒ORF2C端抗原片段的表达及其免疫学特性研究

    ...特性的研究。方法　用pBV220载体进行抗原的非融合表达，包涵体经变性凝胶过滤层析及离子交换层析纯化后透析复性，以Westernblot、ELISA、动物免疫与抗原捕获RT-nPCR等方法研究其免疫学特性。结果　获得了ORF2.3的高效表达，表达...

    参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学
  • IL-2重组毒素的克隆、表达及对IL-2R+淋巴细胞的特异性细胞毒效应

    ...重组毒素IL-2-PE40‘初纯品的制备　超声破菌后,离心收集包涵体,按文献［6］进行变性、复性，在最后得到的上清中加入复性液,对0.01mmol/L的PBS透析48h，期间共换液6次。于透析前、中、后分别取样,加到培养的HL60细胞中,共同孵育6...

    参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学
  • 抗乙肝病毒表面抗原单链抗体在大肠杆菌中的高效表达

    ...菌内外源基因表达量很高时，大部分表达产物以不溶性的包涵体形式沉积在菌体内，这种情况下信号肽仍能被正确切除［8］。形成的包涵体对表达产物的纯化有利，但其为不溶的非活性态，尚需对其进行复性，此研究正在进行...

    参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学
  • 重组人白细胞介素18在原核系统中高效表达的策略

    ...中，培养4h，将温度升至42℃，诱导表达4h。超声破菌提取包涵体，经8M尿素溶解后SDS-PAGE鉴定。BCA法测定蛋白质含量方法按试剂盒说明进行。1.8诱导表达的条件优化野生型重组子分别采用amp浓度为50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml的LB...

    参考资料医源资料库；在线期刊；中华医药杂志；2007年第7卷第9期
  • 工业生物技术与环境生物技术应用研究

    ...因已被克隆并在大肠杆菌中表达，但产生的都是无活性的包涵体，需要蛋白质复性才能获得有活性的酶[2-4]。我们利用融合蛋白技术构建了一套大肠杆菌的表达系统，能够高效的表达可溶性的肝素酶I，并同过亲和分离简化了肝素...

    参考资料医药经济；生物技术；环保技术
  • 单链抗体的研究进展

    ...的表达主要有3种形式：（1）在胞质中表达，抗体片段以包涵体形式存在。其优点是可防止宿主对抗体片段的降解，但分离后还要进行复性、折叠等处理。（2）以胞质融合蛋白形式表达。此表达的关键是要考虑运用特异的融合蛋...

    参考资料医源资料库；在线期刊；中华现代中西医杂志；2006年第4卷第6期

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