...B平板上（含X-gal和IPTG），37℃孵育过夜。挑取白色菌落，提取质粒进行PCR鉴定，筛选阳性克隆，将构建的重组质粒重命名为pBLKSPPA。用BamHI单酶切质粒PUB110和构建的重组质粒pBLKSPPA，纯化单酶切产物加入磷酸酶去磷酸化（防止自连...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2006年第6卷第9期...质相互作用。方法将用酵母双杂交技术筛选出的阳性克隆提取质粒后测序，与CLN8基因表达载体重新共转入酵母细胞，用β-半乳糖苷酶滤膜分析检测，通过滤膜上菌落颜色的改变来确认是否有相互作用。结果滤膜上菌落印迹变蓝...
参考资料合作平台；在线期刊；中华医学研究杂志；2005年第5卷第4期；论著...透照仪及一次成像系统。 1.3 细胞株的培养与质粒的提取、鉴定 HL-60（人早幼粒细胞白血病）细胞株由中国科学院上海细胞所提供。细胞在含10％热灭活小牛血清的RPMI1640培养液中常规传代。将pcDNA3．1（＋）／hp450RAI质粒转...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...试剂盒、pMD18-T载体及DNALigation试剂盒购自TaKaRa公司;质粒提取、纯化试剂盒为QiaGen公司产品;测序试剂盒为ABI公司产品;PCR引物委托上海生工生物工程公司合成。1.3药敏实验及最低抑菌浓度（MIC）测定采用Kirby-Bauer法进行药物敏感性...
参考资料合作平台；在线期刊；中华医学研究杂志；2004年第4卷第7期；论著...药物主要有两大类,一是传统的血制品提纯物,即从血液中提取和纯化凝血因子,经过病毒灭活,制成浓缩药品。二为近年推出的基因重组凝血因子,即将基因克隆入一特定的表达载体,再转化到稳定的细胞培养系,通过培养产生大量凝...
参考资料行业资讯；临床快报；血液... 1.4其他试剂脂质体DOTAP试剂盒（宝灵曼），质粒DNA大量提取试剂盒（Promega），TaqDNA聚合酶、T4DNA连接酶及限制性内切酶等（宝灵曼、华美）。 1.5鼠IL-3编码读框的克隆以pUC18-mIL-3为模板经PCR扩增IL-3编码读框。扩增的5′引物...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...有合适的酶切位点，可进行定向克隆。 1.2.2 碱裂法提取p53与pcDNA3质粒：挑取含有p53质粒的HB101菌种及含有pcDNA3质粒的DH5a菌种，分别接种于含氨苄的LB液体培基中，扩增培养后用碱裂法分别提取p53与pcDNA3质粒。 1.2.3 p53质...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...RNA的5391～5411碱基序列的反义股互补。 1.5 病毒RNA的提取 用DV-2NGC株感染C6/36细胞，待细胞病变达2+～3+时，取200μL病毒培养上清液，根据Chomczynskin的异硫氰酸胍氯仿快速一步法［5］略加改良后，提取病毒核酸RNA。简言之，...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...α基因，表达并初步纯化MIP-3α融合蛋白。方法从扁桃体中提取总RNA，再进行RT-PCR，扩增MIP-3α成熟蛋白基因，并在5‘和3‘分别添加NcoI和EcoRI酶切位点，通过这两个酶切位点重组于pET32a（+）载体上，转化E.coli.DH5α，筛选阳性克隆...
参考资料医源资料库；在线期刊；局解手术学杂志；2006年第15卷第2期...Ri质粒改良植物材料、利用液膜分离技术提高植物材料的提取率、开发长春胺的衍生物及改良药物剂型等方面进行了综合性论述。【关键词】小蔓长春花；长春胺；Ri质粒；液膜分离ObservationonoffcinalVincaminorLSUNYu-hong,YINHong,GAOYang,eta...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华现代中西医杂志；2009年第7卷第1期