...1min,弃上清。加1/2初始培养物体积预冷的0.1mol/LCaCl2溶液悬浮菌体,冰浴10min,4℃、12000×g离心1min,弃上清。加1/25初始培养物体积预冷的0.1mol/LCaCl2溶液悬浮菌体,4℃保存备用。1.2.4质粒的转化[4]取200μl感受态细胞于1.5mlE...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医学实践杂志;2008年第7卷第2期...接种法:取对数生长期细胞,2.5g/L胰酶消化,吹打成单个悬浮细胞,台盼蓝染色并作死、活细胞计数,调整活细胞浓度分别以5×106/0.2mL(A组)和1×106/0.2mL(B组)注入裸鼠右大腿背侧皮下;②瘤块包埋法(C组):细胞悬液接种法...
参考资料医源资料库;在线期刊;现代泌尿外科杂志;2008年第12卷第3期...所以要提取DNA,必须找到较容易溶解菌壁的方法,用丙酮悬浮细菌沉淀破坏细菌菌壁的脂质结构,再用溶菌酶溶壁,效果要比以往方法好得多,所获得的DNA含量高、纯度高。 参考文献 1潘世扬.金黄色葡萄球菌随机扩增多...
参考资料合作平台;在线期刊;中华医学研究杂志;2004年第4卷第12期;检验与临床...气区、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。隔离系统应按相关的要求进行验证,其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。日常检验还需...
词条2010年版药典附录...浴10min。3000rpm,离心10min,去上清。 (5)加溶液Ⅰ5ml悬浮菌体,将悬液倒入高速离心管中,摇匀,冰浴5min。 (6)加溶液Ⅱ10ml轻轻混匀,室温下5min。 (7)加溶液Ⅲ7.5ml轻轻混匀,冰浴30min。15000rpm,4℃离心20min。 ...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...次,使红细胞从底壁上脱离;48h首次半量换液,弃去部分悬浮细胞;72h全换液,以后每2~3d根据培养基颜色全量换液。原代培养第8~12天,贴壁细胞逐渐开始融合并覆盖培养瓶底面达80%以上,吸除培养基并用PBS洗涤贴壁细胞2次,...
参考资料医源资料库;在线期刊;滨州医学院学报;2007年第30卷第4期...活力90%以上。刚接种的软骨细胞呈小圆球形,折光性强,悬浮于培养液中,细胞的大小基本一致。培养24~36h后原代细胞贴壁完成,呈扁平状,多角形,胞浆丰富,胞核清晰,可见1~2个核仁(图1)。培养10~13d后,原代细胞90%融合...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国矫形外科杂志;2008年第16卷第11期...胰酶和0.02%EDTA消化细胞,用培养液将消化下来的细胞重新悬浮成单细胞悬液,计数并调整浓度。EJ细胞以5×104/ml的终浓度接种于96孔板,每孔100μl,在含5%CO2的37℃饱和湿度条件下孵育24h后,然后用由不同浓度MCP-1作用15天的TIL(MCP...
参考资料合作平台;在线期刊;中华医药杂志;2004年第4卷第8期;论著...能三方面进行鉴定。方法无菌取骨髓细胞培养4h后,除去悬浮细胞,然后加入rmGM-CSF和rmIL-4培养,7天后观察DC的形态特征,流式细胞仪(FACS),检测DC表面分子及混合淋巴反应(MLR),检测DC刺激同种异体T细胞增殖的能力。结果培养...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华实用医药杂志;2006年第6卷第14期...7cells/ml)为0.5-0.6。离心弃去上清液,用20ml,50mmol/L,CaCl2悬浮菌体。冰浴20分钟,低温离心。弃上清液,用2.5ml冰50mmol/lCaCl2悬浮。4℃可保存48小时,用于转化,称competentcells。 ⒉质粒(如经基因重组建立的重组质粒,基因库...
参考资料药品天地;专业药学;实验技术;基本实验技术;实验技术