...基中,35℃恒温摇床过夜,取1.5ml菌液离心收取菌体,酚氯仿法抽提后DNA,分光光度法测定抽提后DNA的纯度,A260/A280为1.82~1.98之间,符合DNA样品要求,置-20℃冰箱保存备用。 1.3RAPD反应体系条件的优化 1.3.1引物的设计...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医学研究杂志;2005年第5卷第7期...,加100μl10%SDS,37℃10min,然后转入65℃15min。等体积酚、氯仿、异戊醇(V∶V∶V=25∶24∶1)抽提,上清加1/10体积3mol/LNaAc和2倍体积冰冷乙醇沉淀DNA。于含EB的1.5%琼脂糖凝胶中电泳,85V60min,紫外光下拍照记录。 1.7 统计学方...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...-prM质粒DNA用SpeⅠ酶于37℃消化1h,使之线形化后,加入酚/氯仿进行纯化。体外转录反应,含4种混合的10mmol/L的NTP,10mmol/Lm7G(5′)ppp(5′)G帽子结构类似物,10mmol/LDTT,50URNA酶抑制剂,1.5μg的线性化重组DNA和38U的Sp6RNA聚合酶,...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...SIGMA公司)0.5ml溶解细胞,离心取上清,用饱和酚(pH>7.8)及氯仿、异戊醇(24∶1)抽提,加无水乙醇,-20℃过夜。70%乙醇洗涤后,RNaseA(20μg/ml,北京华美公司)去除RNA,1%琼脂糖凝胶电泳,紫外灯透照下观察片段DNA梯度,并照相记录。...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...3℃δ体:138-139℃溶解性:甲体(α)不溶于水,溶于苯和氯仿;乙体(β)的溶解性同甲体;(γ)丙体在室温水中的溶解度为10ppm,微溶于石油,溶于丙酮、芳烃和氯代烃密度:1.87(20.4℃)稳定性:六六六在高温和日光下不易...
词条...。 1.2.2基因多态性分析 1.2.2.1DNA提取采用标准酚-氯仿抽提法从口腔上皮细胞中提取基因组DNA。测定260nm和280nm光密度值,计算DNA浓度和纯度。 1.2.2.2基因分型采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国学校卫生;2008年第28卷第5期...啉代丙烷磺酸)、去离子甲酰铵购自BBI公司;无水乙醇、氯仿、醋酸钠均为国产分析纯。饱和酚、琼脂糖购自Sangon公司, 1.2方法 1.2.1弓形虫RH株速殖子总RNA的提取及引物 总RNA的提取按试剂盒说明进行,用核酸蛋...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第4期...卵型鉴定卵型鉴定应用DNA短串联重复序列(STR)进行。酚氯仿法提取血凝块中DNA,PCR复合扩增4个多态性位点D16S539,D7S820,D13S317,D5S818(美国Promega公司试剂盒),荧光标记引物,产物经垂直凝胶电泳和激光扫描后,比较4个位点的一...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国学校卫生;2008年第28卷第3期...PCR产物纯化回收[6]后,用大片段Klenow酶室温处理1h;酚/氯仿抽提后,用T4DNA连接酶(20U,16℃孵育24h)使线性DNA分子自身环化,再转化至大肠杆菌TG1,获得的克隆用TM-TNF特异性引物作PCR扩增,并与TM-TNF的PCR产物比较,初步筛选出...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...30s×2次。加ATA饱和的酚2.75ml,强烈振混,30s×2次。加24∶1氯仿:异戊醇0.55ml,强烈振混,30s×2次。冰浴15min后,于4℃,10000rpm离心20min。取上清,加1.1ml异丙醇-20℃冰箱沉淀1h。4℃,10000rpm离心20min。弃上清,将沉淀溶于RNA变性液15...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华现代临床医学杂志;2006年第4卷第9期