...10%SDS),37℃过夜。加入等体积饱和酚抽提。加入等体积的氯仿:异戊醇(24∶1)再抽提。取上清,加入1/10体积3mol/LNaAc和2.5倍体积的无水乙醇,混匀置-70℃10min。10000g离心沉淀DNA,70%乙醇洗涤。样品DNA与上样缓冲液混匀,在含有10μg/...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...法 121组织DNA的提取采用常规的蛋白酶K消化、酚/氯仿/异戊醇抽提和乙醇沉淀法,TE溶解后用紫外分光光度计定量。A260/A280均介于17~20之间,-20℃保存备用。 122DNA的亚硫酸氢盐修饰取1μgDNA按修饰试剂盒说明...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华现代内科学杂志;2009年第6卷第5期...HEIMCO.),按其说明程序进行 DNA标记。 用硫氰酸胍-酚-氯仿一步法提取样品细胞的总RNA[5]。每个实验点取30μg细胞RNA,以含目的基因片段的质粒DNA作为阳性对照;以鲑鱼精子DNA为阴性对照点膜备用。按上述试剂盒说明42℃预...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...法处理手足口病病儿大便标本。采用改良的酸性胍酚氯仿一步法(AGPC)[3]提取血中病毒RNA,并进行纯度及含量分析。RTPCR扩增使用Qiagen公司的onestep试剂盒,操作过程严格按照说明书进行。采用针对EV71VP1段设计型特异引物...
参考资料医源资料库;在线期刊;齐鲁医学杂志;2010年第25卷第4期...盒说明书进行。 四、HCVRNA的提取 用异硫氰酸胍酚氯仿法[1]。 五、HCVRNA的逆转录-套式-聚合酶链反应(RT-Nested-PCR)检测 采用RT-Nested-PCR进行检测。寡核苷酸引物根据中国人HCV基因组序列设计[2],由复旦大学合成...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...及药理作用亦有了更深入的了解。研究表明芦荟在乙醇、氯仿、苯、水的提取物中,乙醇提取物的活性最强,且同种溶剂提取物芦荟的干燥叶比新鲜叶活性强[6]。从芦荟叶提取有活性化学物质的过程分为如下步骤:(1)提取含...
参考资料合作平台;在线期刊;中华医药杂志;2004年第4卷第6期;综述...5ml,2%EDTA抗凝,低渗法提取白细胞,-20℃保存,酚/氯仿法提取基因组脱氧核糖核酸(DNA),PCR方法进行基因扩增,紫外灯下观察结果。WLL前及术后1周取外周静脉血2~3ml,1500r/min离心10min,取血清-80℃保存,酶两点终点法...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医学实践杂志;2006年第5卷第3期...;DYS199R/T5′-GGTACCAGCTCTTCCTAATTA-3′;1.3基因组DNA提取按常规酚氯仿法[4]提取基因组DNA。1.4DYS199的PCR扩增与基因型检测PCR扩增基本按Underhill等人的方法[5]并稍加改进。12.5μl反应体系含:50ng基因组DNA,引物各5μmol/L,dNTP各0.2mmol/L,1...
参考资料合作平台;在线期刊;中华实用医药杂志;2004年第4卷第14期;论著...细胞碎片等,获得纯净的血浆样品,血浆DNA采用标准酚-氯仿方法提取。1.3血浆DNA的亚硫酸转化取8μl的DNA加双蒸水至20μl,加3M的NaOH2μl解链,42℃水浴15min。在每个样品中加入5M的对苯二酚/亚硫酸氢钠溶液360μl,50℃水箱孵育12~...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医药杂志;2007年第7卷第2期...素苷,半边旗活性物质5F,川陈皮素,花青素,文殊兰叶氯仿提取物,银莲花素A,重楼总皂苷,斑蝥素可同时诱导非小细胞肺癌细胞凋亡和周期阻滞。5.2抑制侵袭与转移李现东[32]探讨体外汉黄芩素对肺癌细胞株A549增殖、侵袭...
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