...reS基因),同上步条件扩增[4,5]。PCR产物加等体积酚:氯仿抽提,乙醇沉淀DNA。 1.4重组质粒的构建 分别以限制性内切酶HindIII酶切PCR产物SP和SPP片段,以低熔点纯化回收。同时HindIII酶切质粒pcDNA3和pSV2并以磷酸酶去磷酸...
参考资料合作平台;在线期刊;中华医药杂志;2004年第4卷第8期;论著...NaCl,100mmol/LEDTA,pH8.0),置37℃裂解60min,沸水5min,酚,氯仿抽提DNA乙醇沉淀,沉淀物溶于20μlTE缓冲液(100mmol/LTris-HCl,1mmol/LEDTA,pH8.0)。 (2)引物设计 引物来源于解脲脲原体,脲酶基因序列: UU1:CAGATACATTAAACGAAGCAGG...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;基因诊断与性传播疾病...0%SDS、蛋白酶K,50℃孵育2h,再加入RNaseA室温放置1h。酚、氯仿抽提,取10μlDNA,70℃放5min后,15g/L琼脂糖凝胶,4V/cm电泳3h,观察结果并照像保存。 1.4RT-PCR检测SurvivinmRNA表达变化收集上述各组细胞收集1×106个细胞,提取总RNA...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医学实践杂志;2006年第5卷第8期...液,减压浓缩得浸膏。浸膏加适量的水,分别以石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,将各萃取液回收溶剂得浓浸膏。石油醚部分硅胶柱色谱,石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱,得70份。其中17~19份合并,经中压柱色谱,石油醚-乙...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华现代中医学杂志;2006年第2卷第1期...分泌物经PBS稀解,离心后沉淀物经蛋白求恩酶K水解,酚/氯仿抽提等处理后与沙眼衣原体探针,如外膜蛋白基因的高度保守序列,或TE-55DNA探针等进行斑点杂交,可检出沙眼衣原体的15个血清型,而与其它细菌,病毒、立克次体等...
词条分类词条分类;化验及医学检查;阴道分泌物检查...,cDNA的合成以聚合酶链反应 HEV-RNA采用异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法〔2〕,从感染戊型肝炎病毒猴胆汁中提取。套式聚合酶链反应(RT-PCR)参照文献〔2〕。第1次PCR40次循环,第2次PCR30次循环,循环参数为95℃1min,45℃1min,72℃1min。...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...分泌物经PBS稀解,离心后沉淀物经蛋白求恩酶K水解,酚/氯仿抽提等处理后与沙眼衣原体探针,如外膜蛋白基因的高度保守序列,或TE-55DNA探针等进行斑点杂交,可检出沙眼衣原体的15个血清型,而与其它细菌,病毒、立克次体等...
词条化验及医学检查...57人,女91人。每个提供外周静脉血3ml样本,EDTA抗凝,酚氯仿法提取DNA,对多态位点进行基因分型,同时进行NEO人格自测。 1.2人格测评工具中文版修订的NEO人格测评量表(RevisedNEOPersonalityInventory,NEO-PI-R)总题数240道。测验...
参考资料合作平台;在线期刊;中华医学实践杂志;2004年第3卷第12期;论著...的重组质粒pcDNA3-E溶于灭菌双蒸水100μl,用Tris*Cl饱和酚、氯仿/异戊醇(24∶1)抽提后经3mol/LNaAc(pH5.2)和无水乙醇沉淀,真空抽干,备用。NIH3T3细胞用含1%谷氨酰胺、0.45%NaHCO3和10%胎牛血清的DMEM培养液培养于35mm的培养皿中,37℃培养24...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...涤后移至EP管,加入Trizol裂解液裂解细胞,硫氰酸胍-酚-氯仿一步法提取总RNA。 1.4.1RT-PCR引物及探针采用上海生工生物公司合成的CK19引物及探针。 CK19上游引物:5′-AGGTGGATTCCGCTCCGGGCA-3′;下游引物:5′-ATCTTCCTGTCCCTCGAGC...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华现代临床医学杂志;2009年第7卷第7期