...吸收来。基因载体较难通过这些解剖上的屏障，这使基因转染存在困难。目前有4种途径将基因转移给肾脏:动脉途经、静脉途径、输尿管途径、肾实质直接注射途径。 1.1病毒载体系统 1.1.1逆转录病毒载体半数人类基因治...
参考资料资料库；在线期刊；中华现代外科学杂志；2005年第2卷第1期...在含10%小牛血清的DMEM培养液中的NIH/3T3细胞，收获重组体转染后不同时间的细胞，用RT-PCR和间接免疫荧光试验检测E7基因在3T3细胞中的表达。将不同转染时间收获的细胞作细胞涂片，剩下的细胞提取细胞总RNA后进行RT-PCR，结果发...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...重组的DNA片段导入哺乳动物细胞的方法是用磷酸钙介导的转染。转染的DNA可能是通过吞饮作用进入细胞质，然后进行细胞核。 （1）配制下列溶液 ①2×HEPES-缓冲盐溶液（HBS） ②2mol/LCaCl2 ③0.1×TE(pH8.0)用0.22μm滤器过...
参考资料医源资料库；医源图书馆；教材类；实用免疫细胞与核酸...机制。研究者利用脂质体法将人全长Met基因真核表达质粒转染到内皮细胞株HMEC-1细胞中，G418筛选转染细胞得到阳性克隆，利用PCR和Westernblot分别在mRNA和蛋白水平验证转染情况。利用Transwell和Matrigel分别观察Mer基因过表达对于内皮...
参考资料行业资讯；临床快报；心脑血管相关...并进行序列分析。利用pcDNA3.1和pLXPXSN构建IL-12表达载体，转染人肝癌细胞后对其进行生物学和免疫学分析。结果：北京地区人DC中IL-12p40cDNA基因210位密码子有独特的结构，为GCC(Ala)。并且239和291位密码子与已报道的NKSF和CLMFp40序列...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...肠杆菌β-gal基因为报告基因，优化了3种阳离子脂质体的转染条件，评估了其转染效率。用构建的含腺相关病毒反向末端重复序列（AAV-ITRs）的质粒表达载体，经Dosper介导将小鼠IFNγ基因导入MM45T．Li细胞，体外有效地表达IFNγ。瘤...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...用重组真核表达载体pcDNA3.1（+）/Cbfal-Ⅱ通过脂质体系统转染，用NorthernBlot检测三种成骨细胞特异性细胞外基质蛋白mRNA的表达情况。结果转染后人、大鼠和小鼠的MSCs都有骨钙素、骨桥接蛋白和Ⅰ型胶原的表达，三者间无明显差别...
参考资料合作平台；在线期刊；中华现代临床医学杂志；2004年第2卷第3A期...因；基因治疗 基因治疗的本质就是目的基因、载体与转染的问题，基因治疗的关键就是目的基因的选择。随着人类基因组计划的完成，已有不少的基因被发现及克隆，为肿瘤的基因治疗开拓了广阔的运用前景。但基因治疗仍...
参考资料医源资料库；在线期刊；局解手术学杂志；2004年第13卷第4期...、PIV基因克隆由Iorio博士惠赠。 方法 （1）质粒DNA转染：感染病毒：选生长良好的细胞孔，每孔接种痘苗病毒野毒株25μl，用DMEM培养液稀释，每孔接种0.3ml；另一系列感染痘苗病毒重组株，每6孔板接种量为25μl，即取原液2...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...究者应用荧光显色法、RT-PCR和Westernblot方法，检测PKCαcDNA转染肾癌786-0细胞前后，细胞中多药耐药基因1(MDR1)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和肺耐药蛋白(LRP)表达的变化。采用MTT方法，分别测定阿霉素(ADM)与PKC激动剂以及与PKC抑制剂协...
参考资料行业资讯；临床快报；肿瘤相关