...水相,移至另一离心管中。重复酚抽提一次。加等体积的氯仿﹕异戊醇(24﹕1),上下转动混匀,5000g离心15min,用大口吸管小心吸取上层粘稠水相,移至另一离心管中。重复一次。 4.加入1/5体积的3mol/LNaAc及2倍体积的预冷的...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...20%SDS 5.2mg/ml蛋白酶K 6.Tris饱和酚(pH8.0)、酚/氯仿(酚∶氯仿=1∶1)、氯仿 7.无水乙醇、75%乙醇 二、操作步骤 (一)材料处理 1.新鲜或冰冻组织处理: ⑴取组织块0.3-0.5cm3,剪碎,加TE0.5ml,转移到...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...另一离心管中。 (5)可作不可作:加等量饱和酚,氯仿,振荡混匀,重复2,(4)。 (6)用2倍体积无水乙醇室温沉淀双链DNA,振荡混合,于室温放置2min。 (7)4℃以12000g离心5min。 (8)小心吸尽上清液,将离...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸...另一离心管中。 (5)可作不可作:加等量饱和酚,氯仿,振荡混匀,重复2,(4)。 (6)用2倍体积无水乙醇室温沉淀双链DNA,振荡混合,于室温放置2min。 (7)4℃以12000g离心5min。 (8)小心吸尽上清液,将离...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...,熔点256~257℃;不溶于水,能溶于乙醇,稍溶于乙醚、氯仿、苯,溶于苛性碱水溶液、碳酸钠溶液或氨溶液中并显樱红色。 1.3酸性从它的结构可以看出,在1、8α位上有两个酚羟基,在β位3上有一个羟基。因此分子表现出一...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2006年第6卷第8期... 7.4℃离心10000g×5min,合并上清液; 8.用等体积酚/氯仿、氯仿分别抽提一次,取上清; 9.加入1/10体积3MNaAc(pH5.2)、2.5倍体积预冷的无水乙醇,混匀; 10.-20℃,静置30min; 11.4℃离心13000g×10min,弃上清,75%乙醇...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...质-SDS复合物被高盐沉淀,质粒DNA留在溶液中。不需经酚氯仿抽提,即可直接用乙醇沉淀上请中的p-DNA)。 3)煮沸提取法此法快速简便,既可小规模检验也可大规模制备质粒DNA。其基本原理是在溶菌酶和Triton破壁释放DNA后,迅速...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...出上清,用400μlTE(pH8.0)溶解质粒DNA沉淀。用酚、酚:氯仿、氯仿各抽1次。 7)将水相转到另一微量离心管中,加100μl10mol/L乙醇铵,充分混匀,加2倍体积(约1ml)乙醇,于室温放置10分钟,于4℃以12000g离心5分钟,...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...织,比较显微解剖-巢式PCR法、蛋白酶K消化-PCR法与传统酚氯仿抽提-PCR法3种方法,检测共济失调毛细血管扩张综合征突变基因(ataxiatelangiectasismutated,ATM)的扩增阳性率。结果发现3种方法PCR扩增率分别为84%、52%与64%,显微解...
参考资料行业资讯;临床快报;口腔科...被降解。在上述方案的步骤9)之间增加一步,即用酚:氯仿进行抽提,可以避免这一问题。 ii.此法制备的高考贝数质粒(如Xf3哉pUC),其产量一般约为:每毫升原细菌增减物3-5μg。 iii.如果要通过限酶切割...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术