...吸取上述两种溶液各4μl,分别点同一硅胶G薄层板上,以氯仿-乙醇(20:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以2%3,5-二硝基苯甲酸乙醇液与7%氢氧化钾溶液的的等量混合液,热风吹约粉分钟,至斑点清晰。供试品色谱中,在与对照品...
词条中成药;中医学;方剂学;方剂...制物的影响,许多学者在得到端粒酶延伸产物后进行酚-氯仿-异戊醇(25:24:1)抽提,酒精沉淀纯化[14,15]。 5端粒酶活性的半定量检测 由于端粒酶活性在少数正常组织细胞中有微弱的表达,而且与细胞的增殖活跃程度、肿...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...细胞(1×106)。加入500μl细胞裂解液,65℃温浴过夜。酚/氯仿抽提两次,离心去上清液,获得细胞总DNA,加入0.1mg/mlRnaseA作用1h,将样本置于-20℃保存。取DNA提取物加入加样孔,在1.5%的琼脂糖凝胶中电泳,紫外灯下观察电泳条带...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2005年第5卷第4期...沸裂解法、沉淀煮沸裂解法、碱裂解法、蛋白酶K消化-酚-氯仿法和磁珠核酸提取法等。其中,直接煮沸裂解法和沉淀煮沸裂解法因操作简便、成本较低而得到广泛应用,但直接煮沸裂解法只是通过直接加入裂解液与血浆混合,经...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第7期...ml,注入含枸橼酸钠抗凝的真空管,置-70℃保存。采用酚-氯仿法提取基因组DNA,-20℃保存至分析用。 1.2.2apoE基因的PCR扩增以基因组DNA为模板,PCR扩增apoE基因第4外显子片段。反应引物按Wenham等[1]报道设计,由上海Sangon公司...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华现代内科学杂志;2005年第2卷第10期...十二烷基磺酸钠溶液并置55℃温育30min。此悬液再与10ml酚-氯仿-异戊醇混合液(25:24:1)混匀,并置振荡器强力振摇20min,15000×g离心10min后,取上清液于另一洁净试管,加入2倍体积的乙醇,并用玻棒提取DNA。再悬浮DNA于无菌双蒸水...
参考资料药品天地;专业药学;实验技术;色谱技术;色谱论文...化,溶于1mlH2O中,PEG/NaCl再沉淀一次,溶于0.5mlH2O中,酚、氯仿分别抽提一次,最后用酒精沉淀噬菌体单链DNA(ssDNA)。ssDNA溶于10μlH2O中,其中2μl用于测A260nm和A280nm值,其余用于测序。 1.3 噬菌体抗体克隆测序 测序引物为5′HO-GA...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...检测①DNA的抽提:空腹抽取静脉血5ml,用低渗溶血,酚/氯仿法抽提基因组DNA,加适量TE缓冲液溶解后作为PCR模板。②聚合酶链反应(PCR)方法操作如下:引物设计[2]:P1:5′-ACAGAATTCCGCCCCGGCCTGGTACAC-3′:5′-TAAGCTTGGCACGGCTGTCCAAGGA-3...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国煤炭工业医学杂志;2006年第9卷第11期...取静脉血2~3ml,-20℃保存。1.2样本DMA制备用经典饱和酚-氯仿抽提法[2,3]。试剂购于上海Promage公司,配制在我院实验室完成。1.3引物合成由华美生物工程公司提供,其序列如下:P1:5′-CCTTCAATGGAATGGTCGAT-3′;P2:5′-CCCTTGTAAGGCAAGTC...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华中西医杂志;2006年第7卷第18期....2细菌DNA的制备采用经典酶解法,临床分离株DNA用常规酚/氯仿抽提法提取-20℃保存备用。 1.3引物PCR扩增引物由中国科学院微生物所合成。 1.4PCR扩增采用25μl反应体系,4XdNTPs终浓度为0.2mmol/L,引物终浓度为0.2μmol/L,扩增...
参考资料合作平台;在线期刊;中华医学研究杂志;2004年第4卷第8期;论著