第二十四章 DNA的克隆与序列测定 近20年来分子克隆技术的发展突飞猛进，重组DNA操作技术包括的范围不断扩大，DNA克隆的方法亦多种多样，特别是PCR技术的应用，以及RFLP、SSCP等技术的开展，使得DNA克隆技术的应用日益广...
参考资料医源资料库；医源图书馆；教材类；动脉粥样硬化...法对肾性贫血基因治疗的可行性及疗效。方法 构建一种克隆了促红细胞生成素(EPO)基因的EBV复制子载体pEPO，该载体与半乳糖基化组蛋白结合形成可溶性的核酸蛋白复合物，以静脉注射的方式将复合物导入通过喂饲腺嘌呤造成肾...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学【摘要】目的克隆表达轮状病毒结构蛋白VP4酶切片段VP5*、VP8*。方法以猴轮状病毒SA11株细胞培养物提取总RNA为模板，经RTPCR方法获得VP5*、VP8*全长基因片段cDNA，将其重组于pET30a表达载体，转化大肠杆菌BL21(plyss)，异丙基β...
参考资料医源资料库；在线期刊；滨州医学院学报；2008年第31卷第3期...医科大学肝病研究所 将编码HBV表面抗原的S基因分别克隆到6种不同的真核表达质粒上，包括两种真核质粒载体(pcDNA3.1,pCI-neo),两种逆转录病毒载体(pXT1，pLXSN)和两种EB病毒载体(pCEP4,pMEP4),构建不同的真核表达重组体，经酶切鉴定...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...，经氨基糖甙类新霉素衍生物Geneticin(G418)筛选获得了抗性克隆。用逆转录聚合酶链方法检测胰腺癌细胞株转染TNF-α的基因表达情况，同时用放线菌素D处理后的小鼠成纤维肉瘤细胞L929检测转基因细胞表达TNF-α的活性，并观察TNF-α...
参考资料合作平台；医学论文；特种医学及其他学科论文；实验医学...7Rv基因组为模板，扩增该菌株的异柠檬酸裂解酶基因icl，克隆入原核表达载体pET-28a(+)中，通过在大肠杆菌BL21(DE3)中表达，获得以镍离子螯合型琼脂糖凝胶亲和层析柱纯化的重组蛋白，并对其酶学性质进行测定分析。结果纯化出...
参考资料行业资讯；临床快报；遗传与基因组...广州生物医药与健康研究院成功培育出一种特殊的转基因克隆猪，这种克隆猪在特定波长的激发光下可分别发出红、黄、绿、青4种荧光，这是国际上首次获得能够同时表达四种荧光蛋白的转基因克隆猪。该成果是广州生物院在...
参考资料医药经济；生物技术；技术要闻...苷激酶）与细胞因子FL（Flt-3ligand，Flt-3配体）在同一细胞克隆中表达的特性，为肿瘤的基因治疗提供实验基础。方法 构建以IRES（内部核糖体进入位点）相连的TK与FL的真核表达质粒，脂质体法转入人乳腺癌细胞株MCF-7中。MTT法...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...术，从50A杂交瘤细胞中分离、构建单链抗体基因，并将其克隆入噬粒pCANTAB5E中，转化E.coliXL-Blue，辅助噬菌体援救构建50A噬菌体单链抗体库；采用完整红细胞亲和富集法淘选阳性重组噬菌体，鉴定重组噬菌体并进行序列测定分析...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...0的cDNA，并加上人单核细胞趋化蛋白1的信号肽基因，将其克隆到Pucm-T载体，经酶切及测序鉴定，进而构建CXCL10重组真核表达载体。采用脂质体法体外转染COS-7真核细胞，经Westernblot和趋化指数检测，转染细胞能够表达CXCL10蛋白，...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华医学研究杂志；2006年第6卷第12期