...污染是一个值得特别重视的问题。 四、实验室中克隆质粒的污染:在分子生物学实验室及某些用克隆质粒做阳性对照的检验室,这个问题也比较常见。因为克隆质粒在单位容积内含量相当高,另外在纯化过程中需用较多的用...
参考资料药品天地;专业药学;实验技术;色谱技术;色谱入门...表达及意义。方法:构建重组的正义和反义Ku70基因表达质粒载体分别导入LCA细胞。结果:用Northern印迹杂交法证明Ku70正义、反义基因均可在LCA的mRNA中得到表达,用Western-blotting法去证明细胞中只有导入正义Ku70基因的蛋白表达,...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...对MDR1基因的发夹状RNA(shRNA),并将其分别构建在pGenSil-1质粒中;然后将这两条shRNA分别转染K562/ADM。利用罗丹明外排法、荧光定量PCR来检测这两条shRNA对K562/ADM的多药耐药性的逆转作用。结果在稳定转染的细胞中可以观察到不同...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华现代临床医学杂志;2006年第4卷第6期...的基因探针诊断淋球菌的基因探针诊断,所用的探针有:质粒DNA探针,染色体基因探针和rRNA基因探针。(1)质粒DNA探针①隐蔽质粒DNA探针,淋球菌质粒分为三种:接合性质粒,分子最大,为36kbDNA;耐药性质粒包括两个质粒,DNA...
词条疾病...表达结核菌保护抗原Mtb8.4的真核表达载体。提取并纯化该质粒后,免疫纯系近交系C57BL/6小鼠,免疫小鼠抵抗经静脉注射结核菌H37Rv攻击的能力显著增强,结果报告如下。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1结核菌H37Rv标准株(ATCC...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2006年第6卷第8期...扩增132菌株p菌毛粘附基因群的papA基因,扩增产物克隆入质粒,选取阳性重组质粒进行核苷酸序列分析。结果 UPEC132株经PCR法扩增获得约700bp的papA片段,经克隆获得阳性重组质粒pCT20,对其进行序列分析显示papA编码184个氨基酸多...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...atin全基因。用原核细胞表达载体构建了pBV220/endostatin重组质粒,经DNA测序确认后,将其转化大肠杆菌DH5α进行表达、初步纯化及活性测定。结果 经SDS-PAGE分析,表达产物相对分子质量(Mr)约20×103,薄层扫描显示表达产物可达细菌...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...,加入合成接头以及将双链DNA克隆到于适当载体(噬菌体或质粒)。 一、RNA制备 模板mRNA的质量直接影响到cDNA合成的效率。由于mRNA分子的结构特点,容易受RNA酶的攻击反应而降解,加上RNA酶极为稳定且广泛存在,因而在提取过程...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...构及临床意义。 1 材料与方法 1.1 材料 PGEX-2T质粒;JM109菌株;LacDNAclonepLa*(本中心所存);TaqDNA多聚酶,EcoRI内切酶,BamHI内切酶,T4DNA连接酶;Rnasin;IPTG(Promega);QINprepPlasmidMiniprepKit,DNAextractionKit(Promega)。 1.2 用PCR方法...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学【摘要】目的构建含有HIVtip30与人IFN-γ基因的真核共表达质粒的减毒伤寒沙门菌,以进一步观察以减毒伤寒沙门菌为载体的,联合HIVtip30与IFN-γ的基因对腺样囊性癌的治疗作用。方法以PCR扩增HIVtip30和人IFN-γ基因,分别插入真核表...
参考资料合作平台;在线期刊;中华实用医药杂志;2004年第4卷第23期;论著