...双蒸水13.3μl。于PT-200PCR扩增仪进行如下循环:先94℃预变性4min;然后94℃30s,58℃30s,72℃30s,30个循环;最后72℃延伸10min。PCR产物经1.5%琼脂糖电泳,凝胶回收试剂盒回收PCR电泳产物,与线性化后的pMD18-T载体(Invitrogen公司)4...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第10期...l,10pmol/L上下游引物各1μl,TaqDNA聚合酶1u。反应条件:预变性95℃4min;95℃变性30s,65℃复性30s,72℃延伸45s,10个循环;95℃变性30s,65℃复性30s,72℃延伸4min5s,20个循环;最末延伸72℃7min。PCR产物进行12%聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染观察...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华现代内科学杂志;2007年第4卷第1期...端氨基酸的分析。6.蛋白质的理化性质(两性解离、沉淀、变性、凝固及呈色反应等)。7.分离、纯化蛋白质的一般原理和方法。8.核酸分子的组成,5种主要嘌吟、嘧啶碱的化学结构。9.核酸的一级结构。核酸的空间结构与功能。10....
参考资料医学教育;考研;考研指导...l,TaqDNA聚合酶0.25u,PCR反应条件:95℃5minPCR仪开始循环(预变性)5min,相继94℃变性1min;退火温度55℃30s及72℃15min延伸;循环30次(4℃保存)。将PCR产物在2%琼脂糖溴乙啶凝胶上电泳,在紫外灯下观察结果并照相。1.4统计学处理采用Stat...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医药杂志;2006年第6卷第5期...DsDNA中的一条链跟抗体的Fc段连接,另一条链在PCR第一步变性步骤中就释放到溶液中,使链复制没有空间位阻。而且dsDNA比ssDNA具有更高的稳定性。此外,长链DNA分子更容易用荧光标记和光吸收检测,并且可以引入更多的非同位素...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...DNA模板3μl,ddH2O12.5μl,总体积25μl。PCR反应条件为:94℃预变性5min,94℃变性1min,55℃复性1min,72℃延伸1min,35个循环后72℃延伸10min。PCR产物用1%琼脂糖凝胶电泳分析,电压100V,时间20min。 1.2.4扩增片段的回收、连接、转化将...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2006年第6卷第6期...模板扩增Sg。用PfxPlatinium多聚酶(Invitrogen,Calsbad,CS),在94℃变性15s,55℃复性30s和68℃延伸1min,共28个循环。为将PCR合成的DNA克隆到载体质粒PET100中,设置克隆反应体系,在Topo克隆反应中按照PCR产物DNA与Topo载体PET100分子比率0.5∶1...
参考资料医源资料库;在线期刊;现代泌尿外科杂志;2008年第12卷第2期...组与待测患者的每个外显子的PCR产物各10μl混合,于95℃变性5min后以每分钟降低温度1℃的速度进行复性,直至20℃。复性产物置于3500HTDHPLCWavesystem进样区自动进样,每次进样5μl,不同外显子采用1~3个不同柱温(52.5~66.8℃)...
参考资料合作平台;医学论文;外科论文;耳鼻喉科学...经纤维层局灶性缺血、缺氧、轴浆流阻滞,神经纤维水肿变性而形成。FFA在白斑相应处(包括已消失处)为无灌注区(fillingdefect)。有时还可见到眼底后极部火焰状出血及有白色中心的出血斑。黄斑中心凹周围毛细血管闭塞,...
词条疾病;眼科;视网膜病;全身病与视网膜病变...-3‘,P2:5‘-TAGGTGCTCAATAAATTGTTGCTAAG-3‘。扩增参数为95℃预变性5min;95℃变性60s,53℃复性60s,72℃延伸90s,重复35个循环;72℃延伸10min。 含ApaI多态性位点PCR扩增的引物序列为P1:5‘-ACCTAGGTCTGGATCCTAAATGCAC-3‘,P2:5‘-GTTAGGTTGGACAG...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国学校卫生;2008年第28卷第3期