...1.5％琼脂糖凝胶电泳鉴定RT-PCR产物。 1.5 分子克隆 质粒抽提、DNA酶切、电泳鉴定、回收、连接反应、细菌转化等均参照文献［6］，略加修改进行。 1.6 DNA序列分析 采用PE310型DNA自动测序仪，进行双脱氧末端终止法自...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学【摘要】 目的 方法利用ZhouJian教授提供的重组质粒DNApBV220/eAg,转染DH5α细胞，经30℃培养3小时，42℃培养6小时温度诱导后，提取乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)。经DEAE-SepharoseFastFlow层折纯化后免疫打点分析，收集阳性蛋白。经SDS-PAGE...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...通过双酶切位点将读框完整的目的基因定向插入pBV221表达质粒PRPL启动子下游的多克隆区。结果：此重组表达质粒转化宿主菌后经热诱导培养，可在SDS-PAGE胶上观察到61kD的特异蛋白表达条带，而且它在Westernblot鉴定实验中能被抗pZP...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...状病毒表达系统，构建了中国HIV-1gag基因的杆状病毒表达质粒，得到了表达HIV-1E和B亚型gag的重组杆状病毒。结果 克隆到的E、B亚型gag基因具有完整的阅读框架，无大的缺失和插入，gag重组杆状病毒感染昆虫细胞表达了由gag形成...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...子近端YY1位点突变株的5′端LCR缺损序列的荧光素酶报导质粒，以及不同长度的近端YY1/SP1重叠结合位点基因工程突变LCR的荧光素酶报导质粒；将各种质粒转染到人类子宫颈癌细胞系C33A中，检测在不同LCR序列的控制下对病毒启动子...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...CDK2表达的变化。 1材料与方法 1.1细胞株的培养与质粒的提取、鉴定HL—60(人早幼粒细胞白血病)细胞株由北京医科大学血液病研究所提供。细胞在含10％热灭活小牛血清的RPMI1640培养液中常规传代。带Sra启动子的CDK2表达质...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...苷酸序列并可表达及复制的HBV1.2个拷贝全基因野毒株重组质粒p3.8Ⅱ的S基因。将重组质粒转染HepG2细胞，用Abbott试剂和24种单抗检测转染细胞培养上清中HBsAg的结合力。用重组质粒DNA肌肉免疫小鼠。结果 129Leu变异株转染细胞上清...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...奠定了基础。 1材料和方法 1.1材料pBluescript（－）质粒和DH5α菌种均由本室保存。胃癌手术切除标本，由本校西京医院普通外科提供。DNA重组所用各种限制性内切酶、T4DNA连接酶及反转录酶、RNasin，PCR反应系统(TaqDNA聚合酶...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...要】 目的构建小鼠白细胞介素-5（IL-5）基因真核表达质粒，了解该质粒在真核细胞COS细胞中有效表达情况。方法以含有小鼠IL-5基因的克隆质粒pORF9-mIL-5为模板，通过PCR扩增小鼠IL-5全段基因，应用基因工程技术将扩增的基因...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2007年第7卷第8期...连接的抗体文库。辅助噬菌体M13K07购于Pharmacia公司，Wizard质粒DNA提取纯化试剂盒购于Promega公司。其他试剂均为国产分析纯。 1.2特异性HCVE2噬菌体人源单链可变区抗体的筛选首先将噬菌体抗体库扩增活化，用辅助噬菌体M13K07...
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