...;氯仿、异丙醇、无水乙醇购自北京化工厂(分析纯);引物由北京奥科生物技术公司合成。 1.3病毒RNA的提取 按TrizolReagent说明书进行,所用耗材先用0.1%的DEPC水处理。 1.4引物 参考RV毒株cDNA序列,计算机辅助设计...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第4期...。1990年,PCR技术开始在医学支原领域应用。 早期的引物多参照菌体末端特异性粘附蛋白的DNA序列而设计。Palmer等体外扩增Mg粘附蛋白的部分核苷酸序列,3株Mg均出现37bp的DNA片断,并证明PCR技术可检测到10-15g的mg-DNA,其引物...
参考资料合作平台;医学论文;基础医学论文;微生物学...法准备基因DNA;CETP基因内含子10的splicedonor位点的PCR扩增引物为:5'-CCCTGCGAATTCTTCTTCTGAGGAGTGGAC-3’和5'-ATAATTGCATCCATTGGTGGTGTTSTTGGC-3’,内含子14的splicedonor位点的PCR扩增引物为:5’-CTTCTGTGCTCCAGGGAGGACTCACCATGG-3’和5’-GGCACCCAGTTTCCCCTCCAG...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;动脉粥样硬化...料及方法 真核表达载体的构建:用于目的基因扩增的引物设计参照序列HC-C2〔4〕,引物序列见表1。 采用套式RT-PCR的方法,用4对引物从HCVRNA阳性血清中分别扩增CE1区(1~262AA)及E2区(370~739AA)。扩增产物经电泳回收后...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...子量标准λDNA/EcoRI+HindⅢ、PBR322/hinfⅠ为华美公司产品,PCR引物由北京赛百胜(美国)生物工程公司合成,32P-dATP为北京亚辉公司产品。 1.3 PCR引物的设计 为了扩增irGH基因5′上游序列,按照文献[4]设计出上游引物(P1)(-484--467...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...可变区基因,我们利用设计合成的一对鼠抗体重链可变区引物,采用逆转录PCR方法,扩增抗人肺癌单克隆抗体3D3重链可变区基因[1],并对其进行测序分析,结果表明该DNA全长354bp编码118个氨基酸。 1 材料与方法 单克...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...技术可进一步提高方法的特异性和效率。其原理是:制备引物A、B,引物A与待检RNA3’端互补,并有一T7RNA多聚酶的识别结合位点。逆转录酶以A为起点合成cDNA;引物B与此cDNA3’端互补,逆转录酶同时还具有RnaseH和DNA多聚酶的活性...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸...GenBank公布的Hp ureB DNA序列[5],经微机分析设计两条引物: primer Ⅰ:5’-CGTCGATATCATGAAAAAGATTAGCAG-3’ primer Ⅱ:5’-CGTCGATATCATCCTAGAAAATGCTAA-3’ 引物Ⅰ为ureB蛋白N端的编码序列,引入起始密码子ATG及EcoRV酶切位点,引...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...隆》介绍的方法或试剂盒说明书进行[4]。 1.4 PCR引物设计 根据hCaMⅢcDNA全长序列,在军事医学科学院基础医学研究所研制的核酸分析软件系统辅助下设计一对引物扩增目的基因片段。引物由加拿大Sangon上海生物工程公司...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...rnaltranscribedspacer)-23SrRNA部分基因序列。方法 设计特异性引物,建立检测G.vag的PCR方法,对临床病人阴道分泌物标本进行检测,并对分离出的4株PCR产物进行分子克隆和序列分析。结果 分离出的4株G.vagITS-23SrRNA基因的核苷酸同源...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学