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  • 补体C5b-9复合物诱导大鼠肾系膜细胞iNOSmRNA表达的实验研究

    ...5]。  1.3 大鼠iNOScDNA探针的制备 大鼠iNOScDNA的重组质粒由瑞士Novartis公司移植研究室薛春博士惠赠。采用地高辛(Digoxigenin,DIG)RNA标记试剂盒(SP6/T7,德国B.M公司)制备cRNA探针方法详见文献[6]。  1.4 培养大鼠肾MC的分组处...

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  • 表达人膜辅助因子蛋白基因的猪内皮细胞可抑制人血清补体的细胞毒作用

    ...的带有人EF-1α启动子的pEF-neo哺乳动物表达载体上,得到质粒pCIM和pEFM。利用电穿孔基因转移方法分别转染猪内皮细胞(PEC),以G418筛选稳定表达克隆。用正常人血清处理此转基因细胞来检测其抗补体作用。结果 Northern杂交结果表...

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  • 人白细胞介素-3突变体的构建及在大肠杆菌中表达的研究

    ...奠定了一定的基础。  1 材料与方法  1.1 菌株与质粒 含有人IL-3cDNA质粒pBVhIL-3cDNA由本室构建,PUC18,PUC19质粒,大肠杆菌JM103均为本室保存。pSM53质粒,3 185bp,氨苄青霉素抗性,TAP106Leu,dio,thi,galam,lacU169rpsL,supE44λ{[intra...

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  • 耐药质粒pRST98在不同种属肠道杆菌间的接合及表达

    耐药质粒pRST98在不同种属肠道杆菌间的接合及表达中华微生物学和免疫学杂志2000年第4期第20卷细菌学作者:黄瑞 秦爱兰 闻玉梅单位:黄瑞秦爱兰(苏州医学院微生物学教研室);闻玉梅(上海医科大学)关键词:耐药质粒...

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  • YY1蛋白对HPV16启动子P97的抑制效应依赖于上游的增强子序列

    ...子近端YY1位点突变株的5′端LCR缺损序列的荧光素酶报导质粒,以及不同长度的近端YY1/SP1重叠结合位点基因工程突变LCR的荧光素酶报导质粒;将各种质粒转染到人类子宫颈癌细胞系C33A中,检测在不同LCR序列的控制下对病毒启动子...

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  • 乙型肝炎病毒S基因129Leu和145Arg变异株的抗原表达与DNA免疫研究

    ...苷酸序列并可表达及复制的HBV1.2个拷贝全基因野毒株重组质粒p3.8Ⅱ的S基因。将重组质粒转染HepG2细胞,用Abbott试剂和24种单抗检测转染细胞培养上清中HBsAg的结合力。用重组质粒DNA肌肉免疫小鼠。结果 129Leu变异株转染细胞上清...

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  • 分子生物学试验方法探讨四-PCR常见问题

    ...1:8或8:1也行。应测定比值范围。连接用5ul2X连接,50ng质粒DNA,1Weiss单位的T4连接酶,插入片段共10ul。室温保温1小时,或4oC过夜。在这2种温度下,缺T-凸出端的载体会自连,产生蓝斑。室温保温1小时能满足大多数克隆要求,为...

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  • 致肾盂肾炎大肠杆菌papA基因的克隆及序列分析

    ...扩增132菌株p菌毛粘附基因群的papA基因,扩增产物克隆入质粒,选取阳性重组质粒进行核苷酸序列分析。结果 UPEC132株经PCR法扩增获得约700bp的papA片段,经克隆获得阳性重组质粒pCT20,对其进行序列分析显示papA编码184个氨基酸多...

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  • 通过进化生物学途径从植物共生放线菌中寻找强生理活性化合物研究取得进展

    ...物的宏基因组Fosmid文库,含有137万个克隆子。5、从50万个质粒中筛选得到2个AHBA合成酶阳性克隆,全序列测序表明其中1个质粒可能含有植物美登木素生物合成部分基因簇。6、通过16srRNA序列分析,确定了WXC菌株是滑桃树种仁的内...

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  • PCR实验技术

    ...中,用2UTaqDNA聚合酶和800μmol/LdNTP(四种dNTP各200μmol/L)以质粒(103拷贝)为模板,按95℃,25s;55℃,25s;72℃,1min的循环参数扩增HIV-1gag基因区的条件下,引物3′端错配对扩增产物的影响是有一定规律的。A∶A错配使产量下降至...

    词条手术

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