...3.3μl。按下述条件进行PCR反应(9600扩增仪):第一步95℃变性11min;第二步94℃变性1min,59℃复性1min,72℃延伸1min,循环28次;第三步60℃延伸45min。 1.4.3扩增产物检测在0.2ml离心管中分别加入去离子甲酰胺2.2μl,ROX-5000.4μl和PCR产...
参考资料合作平台;在线期刊;中华医学研究杂志;2004年第4卷第6期;论著...4~5小时。1987年,Mullis和Faloona最早应用DNA聚合经过高温变性,降温退火,适温延伸三个步骤,反复循环30~40次,可将标本中的DNA量扩增109~1012。Φstergaard等[8]经过40个循环,可检测10-17g的CTdNA,相当于1个拷贝的质粒,检测敏感...
参考资料合作平台;医学论文;基础医学论文;微生物学...;PCRBeads,灭菌蒸馏水18.75μl,总体积25μl。循环参数94℃预变性4min;94℃1min,60℃1min,72℃1min;33个循环;72℃,延伸5min。 1.3.5凝胶电泳成像电泳缓冲液采用0.5×TBE,配1.5%琼脂糖凝胶(含0.5μg/mlEB),吸7μlPCR产物与2μl3×LoadingDye混...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2006年第6卷第9期...蛋白的15%左右。重组蛋白以包涵体形式存在,经溶解、变性、复性、GST-Sepherose4B亲和层析纯化、凝血酶裂解融合蛋白,得到sTNFR蛋白。Westernblot分析表明:表达产物为sTNF受体蛋白。(收稿:1998-08-26 修回:1998-10-15)作者:风...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...无活力的裂解型(cleaved-form,C型)[11].L型抑制剂可以通过变性和复性方法转变成A型,然后又慢慢变成L型.流感病毒血细胞凝集素(influenzahemagglutinin,HA)在pH诱导下的结构变化与细胞膜融合功能紧密相关的.HA在pH7.0时,其空间结构是由heli...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...方法,它是以精子的畸变率来评价化合物的生殖毒性和诱变性的。此试验简单、经济,可重复性强,实验终点明确,结果阳性的化合物可认为是哺乳动物生殖细胞的潜在诱变剂。在本研究中,精子畸变试验的阳性对照环磷酰胺和...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华实用医药杂志;2010年第10卷第2期...核苷酸单体聚合而成的大分子。核酸可分为核糖核酸RNA和脱氧核糖核酸两大类DNA。当温度上升到一定高度时,DNA双链即解离为单链,称为变性(denaturation)或熔解(melting),这一温度称为熔解温度(meltingtemperature,Tm)。碱基组...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;细胞生物学...能使细胞、组织破裂;高温可使细胞内蛋白质(包括酶)变性,低温可使血管收缩、受损、引起组织缺血、细胞损害;电流通过组织时引起高温,同时也可直接刺激组织、特别是神经组织,引起功能障碍;电离射线能直接或间接...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;病理学...引物P2:5‘CGACAGTTGCTATGCGATGCA3‘。②反应条件:94℃预变性3min,1个循环;94℃变性30s,60℃退火30s,72℃延伸20s,30个循环;72℃延伸10min,1个循环,琼脂糖凝胶分离DNA片段。1.5realtimePCR反应(SYBRGreenKit[4])①标准品制备:将...
参考资料医源资料库;在线期刊;滨州医学院学报;2009年第32卷第3期...记物,采用随机引物法或缺口平移法标记DNA探针,将探针变性后即可用于细胞分裂中期或间期细胞核染色体的原位杂交并产生DNA-DNA杂交体,这种杂交体可以被与半抗原有高度亲和力的荧光标记分子所检测到,而这种杂交信号又...
参考资料合作平台;医学论文;基础医学论文;遗传学