...系KGla细胞免疫小鼠，取其脾细胞，RT-PCR扩增VH和Vκ基因并克隆入噬菌体展示表达载体，构建scFv文库，并测定文库的库容量和BstN1酶切单个克隆分析文库的多样性。用KGla作为固相抗原，进行四轮吸附-洗脱-富集的筛选，SDS-PAGE检验...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...，因此其最基本的工程就是要得到目的基因或核酸序列的克隆。分离或改建的基因和核酸序列自身不能繁殖，需要载体携带它们到合适的细胞中复制和表现功能。对理想的基因工程载体一般至少有以下几点要求： ①能在宿主...
参考资料医源资料库；医源图书馆；教材类；生物化学与分子生物学...011为模板，扩增出HCV截短的核心抗原（1－120aa）的基因，克隆于表达载体pGEX-4T3,并转化于大肠杆菌BL21,IPTG诱导HCV截短的核心抗原的表达，表达产物经过SDS-PAGE,Western-blot,ELISA等一系列鉴定试验进行了分析。结果成功地构建了HCV核心...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华医药杂志；2006年第6卷第11期...和筛选，并进行竞争结合实验，用ELISA法筛选噬菌体阳性克隆并对其进行DNA序列分析。结果随机挑选的10个克隆中有6个与人CD59结合力高，测序后得到2个高度同源的氨基酸序列。结论获得了与高表达人CD59的CHO细胞结合的内化短肽...
参考资料医源资料库；在线期刊；齐鲁医学杂志；2006年第21卷第3期...的思路。1材料与方法1.1材料SP免疫组化试剂盒、IGF-ⅠR多克隆抗体（北京中山公司），质粒提取试剂盒、DNA纯化试剂盒、脂质体转染试剂盒、限制性内切酶、连接酶（Promega公司），载体pBluescriptSK（stratagene公司）、pCMVhygro（上海...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华实用医药杂志；2009年第9卷第3期...原核表达。研究者通过连接肽将HPV11-E7与人IFNα-2b连接并克隆至原核表达载体pET-32a，进行酶切鉴定及DNA序列分析。将重组质粒转染E.coliBL21，经IPTG诱导后对其表达产物进行SDS-PAGE和Westemblotting分析。结果测序结果表明将HPV11-E7和人IF...
参考资料行业资讯；临床快报；药理学...设计引物，引入两个不同的限制性内切酶突变位点，然后克隆到表达载体，再将构建成的重组表达载体转化大肠杆菌和酵母，筛选阳性克隆并以IPTG或甲醇诱导重组蛋白的表达。利用亲和层析对表达产物进行多级纯化，获得高纯...
参考资料医药经济；生物技术；技术要闻...，鼠抗兔Ⅱ型胶原抗体（Calbiochem公司），羊抗人BMP7多克隆抗体（Sigma公司），鼠抗兔S100单克隆抗体（Sigma公司），SABC试剂盒（武汉博士德公司），含BMP7全长cDNA的模板购自美国PTGLAB，其载体为pCMVSPORT6（全长1815bp）；TagD...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国矫形外科杂志；2006年第14卷第11期...基因表达载体Pet32a-Core，为下一步Core蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备奠定基础。【关键词】丙型肝炎病毒；核心基因；载体构建 AmplificationofHCVcoregeneandconstructionofrecombinantexpressionvectorPet32a-Core. YANGHong，FangShi-song，HeYa-q...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2008年第8卷第4期...向阳研究组的王春涛博士与博士生孔翔祥等人员，基于TA克隆技术建立了一套全新的基因连接与克隆系统。这一套系统完全克服了传统克隆过程中上述难题，而且具有操作简易、高效、稳定等特点。研究组成员将这套系统成功地...
参考资料医药经济；生物技术；技术要闻